WB、IF/ICC、ELISA用抗RFC1ウサギポリクローナル抗体 - P35251

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：RFC1の機能と局在

• RFC1は、活性化因子1としても知られるヘテロ五量体複製因子C（RFC）複合体の大サブユニット（140 kDa）をコードします。
• RFC複合体は、DNAポリメラーゼδおよびεによるプライミング済みDNA鋳型の伸長に必要であり、ATP依存的にPCNAをDNA上へローディングします（PubMed:9488738）。
  関連文献：
  PMID:9488738
• このサブユニットはプライマー・鋳型接合部に特異的に結合し、一本鎖および二本鎖DNAの両方に加えて、PO-B転写エレメントを含むGAリッチ配列とも相互作用できます。このことから、DNA複製と転写制御の両方における二重の役割が示唆されています。
• RFC1は核に局在し、胎盤を除くヒトの各組織で広く発現しています。
• 大規模プロテオーム解析により示されているように、このタンパク質はリン酸化やユビキチン化（イソペプチド結合）などの翻訳後修飾を受けます。
• RFC1の変異は、小脳性運動失調、ニューロパチー、前庭反射消失症候群（CANVAS）と関連しており、DNA代謝の中核的機能を超えて臨床的意義を広げています。
• 選択的スプライシングにより複数の転写産物バリアントが生成され、機能的多様性に寄与しています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• ウエスタンブロットでは、約128 kDaのバンドが予想されます。高分子量タンパク質を最適に分離するには、6～8% SDS-PAGEを使用してください。
• 免疫蛍光法／ICCでは、核対比染色（例：DAPI）を含め、核局在を確認してください。透過化条件の最適化が必要となる場合があります。
• ELISA：本抗体は組換えRFC1または内在性RFC1の検出に使用できます。適切な濃度範囲を設定してください。
• ヒト、マウス、ラット間で免疫原（aa 400～700）の配列アライメントを行ったところ、高度に保存されていることが示され、報告されている交差反応性を支持しています。ただし、使用する実験系で検証してください。

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