抗RhoGAP (p190-B) ウサギモノクローナル抗体 WB, IP, ELISA対応 - Q13017

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：RhoGAPの機能と局在

• Rho GTPase活性化タンパク質5（ARHGAP5、別名p190-B、RhoGAP5）はRhoGAPファミリーの一員で、Rhoファミリー低分子GTPaseに対するGTPase活性化タンパク質（GAP）として機能し、本来のGTP加水分解活性を増強してシグナル伝達を終結させます（PubMed:8537347）。 関連文献: PMID:8537347
• 本タンパク質は選択的スプライシングを受け、複数のアイソフォームが生成されるため、組織特異的な発現と機能的多様性を示す可能性があります。
• ARHGAP5は主に細胞質に局在し、細胞膜と結合することができます。これは、膜近傍のシグナル伝達部位でRho GTPaseを制御するという役割と一致しています。
• 本タンパク質はリン酸化タンパク質であり、その活性はチロシンリン酸化によって調節される可能性があり、増殖因子およびインテグリンシグナル伝達経路と関連しています。
• タンパク質レベルでは皮膚線維芽細胞に特異的に検出されることから、線維芽細胞生物学、ひいては創傷治癒や結合組織リモデリングに関与することが示唆されています。
• UniProtのキーワード: 3D構造、選択的スプライシング、細胞膜、細胞質、GTPase活性化、膜、ニトロ化、リン酸化タンパク質、プロテオミクス同定、参照プロテオーム、リピート。これらは本タンパク質の構造的および調節的特徴を示しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトRhoGAP（Q13017）のアミノ酸1150～1300に対応しており、この領域は種を超えてよく保存されている可能性があります（マウスおよびラットと交差反応します）。配列アライメントまたは初期のウエスタンブロット分析により、対象の種における特異性を検証してください。
• ウエスタンブロッティングの場合、予測分子量は約172 kDaです。適切なゲル濃度（例：6～8% SDS-PAGE）とローディングコントロールを使用してください。組織発現データに基づき、陽性コントロールライセート（例：皮膚線維芽細胞ライセート）を用いてバンドの特異性を確認してください。
• 免疫沈降（IP）実験では、滴定により抗体濃度を最適化し、適切なIgGコントロールを含めてください。後のWB検出における重鎖の干渉を低減するため、抗体をビーズに架橋することを検討してください。
• ELISAの場合、アッセイフォーマットに応じて、適合する検出抗体とペアにするか、捕捉抗体として使用してください。組換えRhoGAPタンパク質または標的を発現する細胞ライセートを用いて検証してください。
• 本抗体はウサギ由来のモノクローナル抗体であるため、ロット間で安定した性能が期待できます。ただし、新しいロットを使用する際は、ご自身の特定の用途および試料系で必ず再検証を行ってください。

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