WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 抗RPA2 ポリクローナル抗体 - P15927

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：RPA2の機能と局在

• RPA2は、レプリケーションプロテインA 32 kDaサブユニット (RP-A p32) またはRP-A p34とも呼ばれ、RPA1 (70 kDa)、RPA2 (32 kDa)、RPA3 (14 kDa) を含むヘテロ三量体レプリケーションプロテインA (RPA) 複合体の構成要素です。
• RPA複合体は、DNA複製、修復、組換えの過程で生じる一本鎖DNA (ssDNA) 中間体に結合して安定化し、それらの再アニーリングを防ぎ、主要な代謝タンパク質のリクルートを促進します。
• DNA複製において、RPAは開始段階と伸長段階に必須であり、プロセッシブなDNA合成を保証し、複製フォークを保護します。
• DNA損傷時には、RPA複合体はセンサーおよびプラットフォームとして機能します：ATRIPを介してATRキナーゼをリクルートしDNA損傷チェックポイントを活性化するとともに、相同組換えのためのRAD51やRAD52、ヌクレオチド除去修復のためのXPAやXPGなどの修復因子をリクルートします。
• RPA2はまた、ウラシル-DNAグリコシラーゼ (UNG) との相互作用を介した塩基除去修復 (BER) や、損傷部位へのSMARCAL1/HARPのリクルートによる複製フォーク再開にも役割を果たします。
• さらに、RPAは、鎖間架橋修復とテロメア維持に関与するBRIP1/FANCJの5'-3'ヘリカーゼ活性を刺激します。 関連参考文献： PMID:17596542
• このタンパク質は主に核に存在し、PMLボディーに局在します。リン酸化、アセチル化、ユビキチン化を含む広範な翻訳後修飾を受け、DNA代謝におけるその機能を調節します。
• 選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成され、観察される分子量は29、30、38 kDaとなります。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトRPA2の残基1-270に対応しているため、この抗体は複数のアイソフォームを認識する可能性があります。ウェスタンブロットでは、29–38 kDa付近のバンドを予期してください。関連するヒト細胞株または組織で検証してください。
• RPA2は核内リン酸化タンパク質です。細胞溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を使用することを検討し、必要に応じて、リン酸化依存性のシフトを解明するためにホスファターゼ処理したサンプルと比較してください。
• 免疫組織化学 (IHC-P) では、標準的な抗原賦活化法を推奨します。使用する組織タイプに合わせて一次抗体希釈率と検出条件を最適化してください。
• 免疫蛍光 (IF/ICC) では、核内抗原に適した固定および透過処理プロトコルを使用してください。特異性を確認するための適切な対照を含めてください。
• この抗体はELISAにも適しています。組換えタンパク質またはライセートが適切にコーティングおよびブロッキングされていることを確認してください。

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