Anti-Rpb1 CTD Rabbit Monoclonal Antibody for WB, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - P24928

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：Rpb1 CTDの機能と局在

• POLR2Aは、DNA依存性RNAポリメラーゼII（Pol II）の最大の触媒サブユニットであるRpb1をコードし、mRNA前駆体および非コードRNAの合成を担っています。この酵素はDNAを鋳型として使用し、リボヌクレオシド三リン酸を重合してRNAを合成し、開始、伸長、終結の段階を経て進行します。(PubMed:23748380, PubMed:27193682, PubMed:30190596, PubMed:28108474, PubMed:8381534, PubMed:9852112) 関連参考文献： PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596, PMID:28108474, PMID:8381534, PMID:9852112
• Rpb1のCTDは52個のタンデムヘプタペプチドリピートを含み、転写制御因子の足場として機能します。Ser5のリン酸化（Ser5P）はプロモーターからの脱離を促進し、Ser2のリン酸化（Ser2P）は一時停止の解除と伸長に必要です。さらに、CTDのリシンアセチル化は即時早期遺伝子の誘導を調節し、メチル化/ジメチル化は一般的に標的遺伝子の発現を抑制します。(PubMed:24207025, PubMed:26124092) 関連参考文献： PMID:24207025, PMID:26124092
• Rpb1は、新生RNAの校正を行う3'→5'エキソヌクレアーゼ活性を持ち、バックトラッキングと取り込み間違いヌクレオチドの切断を可能にします。(PubMed:8381534) 関連参考文献： PMID:8381534
• DNA依存性の役割に加えて、Rpb1はRNA依存性RNAポリメラーゼ活性を示し、内部鋳型を使用して非コードRNAを伸長させ、ウイルス性小型デルタ抗原と結合している場合、デルタ肝炎ウイルスゲノムを複製することができます。
• Rpb1は主に転写が行われる核に局在しますが、細胞質や染色体でも検出されており、転写および潜在的な核外機能における役割と一致しています。
• Rpb1の翻訳後修飾には、リン酸化、アセチル化、メチル化、ユビキチン化、およびSUMO化が含まれ、その活性と相互作用を動的に調節します。
• POLR2Aの選択的スプライシングは複数のアイソフォームを生成しますが、機能的な違いは完全には解明されていません。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はCTD内のアミノ酸1611-1710に対応するため、この抗体は全長Rpb1または特定のCTDエピトープを検出すると考えられます。ホスファターゼ処理サンプルを使用して、リン酸依存性の反応性を確認してください。
• ウェスタンブロットでは、全長Rpb1タンパク質は約217 kDaと予測されます。追加のバンド（例：約64 kDa）は、アイソフォームまたは分解物を表している可能性があるため、適切なコントロールで検証してください。
• この抗体はChIPアッセイに応用されています。特定のターゲット座位に合わせて、架橋およびクロマチン断片化の条件を最適化してください。
• 免疫蛍光では、核染色が期待されます。局在を確認するために、細胞質マーカーによる二重染色を行ってください。

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