WBおよびELISA用抗RPE65ポリクローナル抗体 - Q16518

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：RPE65の機能と局在

• RPE65はレチノイドイソメロヒドロラーゼ、p63、BCO3、LCA2、RP20、rd12、mRPE65、sRPE65とも呼ばれ、視覚サイクルにおける鍵酵素です。
• オールトランスレチニルエステルを11-シスレチノールに変換するイソメロヒドロラーゼ切断反応を触媒し、視覚の発色団である11-シスレチナールの再生における重要なステップを担っています。 関連参考文献: PMID:16116091
• 機能研究で示されている通、RPE65は桿体および錐体の両光受容体に供給する11-シスレチナールの生産に不可欠です。 関連参考文献: PMID:17848510
• この酵素はルテインに対するイソメラーゼ活性も示し、眼特異的カロテノイドであるメソゼアキサンチンに変換します。 関連参考文献: PMID:28874556
• 亜細胞レベルでは、RPE65は細胞質、細胞膜、小胞体膜に局在し、膜との会合はパルミトイル化によって制御されています。
• タンパク質レベルでの発現は網膜色素上皮（RPE）に特異的に高いことが知られています。
• RPE65遺伝子の変異は、レーバー先天性黒内障2型（LCA2）や網膜色素変性症20型（RP20）をはじめとする遺伝性網膜ジストロフィーと関連しています。
• アセチル化、パルミトイル化、リン酸化といった翻訳後修飾が、その活性や亜細胞内輸送の調節に重要な役割を果たしています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本抗体の免疫原はヒトRPE65のアミノ酸340～440領域をカバーしており、この領域はヒトとマウス間で保存性が高いため、今回確認されている交差反応性が生じていると考えられます。他の種に対する反応性が必要な場合は、配列アライメントにより事前に確認することを推奨します。
• ウエスタンブロッティング（WB）の場合、予測分子量は61 kDaです。適切な陽性コントロール（例：網膜色素上皮溶解物）を使用し、ブロッキング条件を最適化することで非特異的バンドを最小限に抑えてください。
• ELISAの場合、本ポリクローナル抗体は捕捉抗体または検出試薬として使用可能です。最適な作用濃度を決定するため、使用するアッセイバッファー中での滴定を推奨します。
• RPE65は膜結合型タンパク質であるため、下流のアプリケーションに向けたタンパク質抽出効率を向上させるため、0.1% Triton X-100やNP-40などの穏和な界面活性剤を含む溶解バッファーの使用を検討してください。

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