抗RTF1ウサギポリクローナル抗体 (WB, ELISA用) - Q92541

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：RTF1の機能と局在

• RTF1（RNAポリメラーゼ関連タンパク質RTF1ホモログ、別名GTL7およびKIAA0252）は、RNAポリメラーゼIIの転写伸長およびクロマチン修飾を制御するPAF1複合体（PAF1C）のコアコンポーネントです。
• PAF1Cは、非リン酸化型およびリン酸化型（Ser-2およびSer-5）の両方のPOLR2AのC末端ドメイン（CTD）との相互作用を通じてRNAポリメラーゼIIと結合し、TCEA1などの伸長因子と独立して、あるいは相乗的に作用します。
• この複合体は、Hox遺伝子やWnt標的遺伝子を含む発生遺伝子の転写に不可欠であり、KMT2A/MLL1再構成オンコタンパク質との結合を通じて造血および白血病発症に関与しています。
• RTF1は核内の核質に局在しており、これは転写制御における役割と一致しています。
• PAF1Cはヒストン修飾に関与しています。RNF20/40 E3ユビキチンリガーゼおよびUBE2A/B E2酵素をリクルートしてヒストンH2BのLys-120のモノユビキチン化（H2BK120ub1）を触媒し、幹細胞多能性遺伝子におけるヒストンH3のLys-4のトリメチル化（H3K4me3）に必要とされます。
• このタンパク質はコイルドコイルドメインを含み、一本鎖DNAに結合し、リン酸化によって制御されます。
• インフルエンザA型H3N2ウイルス感染中、PAF1CはウイルスNS1タンパク質と相互作用し、宿主遺伝子の転写を調節します。
• RTF1は熱ショック遺伝子の最大誘導に必要です。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトRTF1のアミノ酸300-400にまたがる合成ペプチドです。ペプチドブロッキング実験を通じて抗体の特異性を検証する際に、この領域の使用を検討してください。
• ウェスタンブロットにおいて、ヒトRTF1の予測分子量は約80 kDaです。マウスとの交差反応性が報告されているため、適切なポジティブおよびネガティブコントロール（ヒトおよびマウス細胞ライセートなど）を用いて検証してください。
• 本抗体はELISAに適しています。標的の核質局在に基づき、コーティングおよび検出条件を最適化してください。
• RTF1はリン酸化タンパク質です。翻訳後修飾が特定のサンプル調製における検出に影響を与える可能性があることに留意し、必要に応じて溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を加えることを検討してください。
• シグナルを濃縮するには、RTF1の核内局在のため、核抽出液の使用が有効な場合があります。

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