WB、ELISA用抗Rubiconウサギポリクローナル抗体 - Q92622

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：Rubiconの機能と局在

• Rubicon（Runドメイン、Beclin-1相互作用ドメインおよびシステインリッチドメイン含有タンパク質）はBaronとしても知られ、RUBCN遺伝子（KIAA0226）にコードされています。選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが産生されます。
• Rubiconはオートファジーおよびエンドソーム輸送の中心的な阻害因子として機能します。PIK3C3活性を抑制し、PI3KC3-C2複合体の機能を損ない、オートファゴソームの成熟を阻害するとともに、エンドソーム上でのUVRAG依存的なRab7活性化を妨げます。 関連文献： PMID:20974968 PMID:21062745
• 活性化マクロファージでは、RubiconはCYBA:CYBB NADPHオキシダーゼ複合体を安定化し、TLR2依存的なROS産生および食作用による殺菌を促進することで、抗菌応答を促進します。 関連文献： PMID:22423966
• 真菌またはウイルス感染後、RubiconはCARD9に結合してシグナル伝達複合体から隔離することにより、炎症促進性サイトカインの産生を負に制御します。 関連文献： PMID:22423967
• 細胞内では、Rubiconは後期エンドソーム、リソソーム、初期エンドソームに局在し、エンドサイトーシス輸送およびオートファゴソーム制御における機能と一致しています。
• このタンパク質にはリン酸化部位が存在し、翻訳後修飾を受けます。また、神経変性経路に関与し、プロテオミクス研究で同定されています。
• 予測分子量は108.6 kDaで、SDS-PAGEでは約109 kDaとして実験的に移動します。

実験上の指針および技術的ヒント

• 免疫原はN末端ドメイン（アミノ酸1～200）に相当するため、既知のすべてのアイソフォームを検出できる可能性があります。関連する細胞および組織ライセートで特異性を確認してください。
• ウエスタンブロッティングでは、還元条件のSDS-PAGEとニトロセルロース膜の使用を検討してください。予想されるバンドは約109 kDaです。
• 最適な使用濃度は実験的に決定してください。WBにおけるポリクローナル抗体の一般的な開始希釈倍率は1:500～1:2000です。
• 本抗体はマウスおよびラットのRubiconと交差反応するため、げっ歯類モデルを用いた比較研究に適しています。
• ELISAでは、組換え免疫原を陽性対照として使用し、抗体を適切に滴定することを検討してください。
• 陽性および陰性対照（例：RUBCNノックダウンまたはノックアウトライセート）を用いて、特定の実験系で抗体を検証してください。

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