抗S100A8ウサギポリクローナル抗体（WB、IHC-P、ELISA対応） - P27005

製品の主要仕様・パラメータ

生物学的背景：S100A8の機能と局在

• S100A8はS100ファミリーに属するカルシウム・亜鉛結合性の小型タンパク質（10295 Da）で、カルグラニュリンA、MRP-8、p8、CP-10としても知られています。
• 主に好中球の走化性誘導と接着促進を介して、炎症プロセスと自然免疫応答の調節に重要な役割を果たします。
• 細胞内ではS100A8/A9（カルプロテクチン）複合体の一部として、白血球におけるアラキドン酸輸送を促進し、食細胞遊走時のチューブリン依存的な細胞骨格再編成を調節し、酵素複合体の集合促進とアラキドン酸の複合体への転移によりNADPHオキシダーゼを活性化します。
• 細胞外ではアラーミン（DAMP分子）として作用し、TLR4やAGERなどのパターン認識受容体に結合します。これによりMAPキナーゼおよびNF-κBシグナル伝達を誘発して炎症促進性カスケードを増幅し、さらにZn²⁺キレート化を介した直接的な抗菌活性も持ちます。
• S100A8は、ミトコンドリアとリソソームの間のROSおよびBNIP3を介したクロストークにより、オートファジーおよびアポトーシスを介して細胞死を誘導することができ、ITGAM/ITGBおよびTLR4を介したMEK-ERK経路を通じて好中球の生存を調節します。
• UniProtのキーワードと機能データによると、S100A8はiNOS-S100A8/A9トランスニトロシラーゼ複合体の一部としてS-ニトロシル化反応に関与し、標的タンパク質の部位選択的修飾に寄与しています。
• 細胞内局在として、S100A8は細胞質、細胞骨格結合領域、細胞膜に存在するほか、細胞外空間にも分泌されます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本抗体では、マウスS100A8（NP_038678.1）のアミノ酸1-89番をカバーする組換えタンパク質を免疫原として使用しています。この配列は完全長タンパク質（予測分子量約10 kDa）のほぼ全体に相当するため、本抗体は天然型を認識することができます。ウエスタンブロットでは10～12 kDa付近にバンドが検出されます。還元と変性処理によりエピトープを完全に露出させることが推奨されます。
• ポリクローナル抗体の性質上、ロットごとにわずかな差異が生じる場合があります。マウス骨髄や脾臓溶解液、あるいはS100A8の発現が誘導された細胞（例：LPS処理したマクロファージ）などの既知陽性対照を用いて性能を検証することを推奨します。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、抗原賦活化条件（例：クエン酸緩衝液pH6.0による加熱誘導型エピトープ賦活化）の最適化が必要で、内在性ペルオキシダーゼの失活処理が必要となる場合があります。記載の通り、ラット組織との交差反応性がありますのでご確認ください。
• ELISAアプリケーションでは、組換えS100A8をコーティングするか、適合する抗体ペアを用いたサンドイッチ法を使用し、関連する陰性対照を用いて特異性を確認してください。

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