ウエスタンブロット、ELISA用 抗SARS-CoV-2 NSP15 ウサギポリクローナル抗体 - P0DTD1

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：NSP15の機能と局在

• NSP15は、SARS-CoV-2のrep遺伝子によってコードされ、大きなORF1abポリタンパク質（複製酵素ポリタンパク質1abとしても知られる）の一部を形成します。このポリタンパク質は、ウイルスのライフサイクルに必須の複数の非構造タンパク質（NSP）にプロテオリチックに切断されます。
• NSP15はウリジル酸特異的エンドリボヌクレアーゼ（EndoU）として機能し、ウイルスゲノムおよびサブゲノムRNAのpoly(A)領域の複製中に生成される5'-ポリウリジンを分解することで、ウイルスの転写と複製に重要な役割を果たします。この活性により、poly(A)テールとハイブリダイズして宿主のdsRNAセンサーを活性化する可能性のあるpoly(U) RNAの蓄積が防止され、自然免疫検出を回避します。 関連参考文献： PMID:33504779 PMID:33564093
• NSP15のエンドヌクレアーゼ活性は、MDA5/IFIH1、OAS、PKRなどの宿主細胞dsRNAセンサーの同時活性化を防ぎ、免疫回避を促進します。
• NSP15は、複製-転写複合体（RTC）と関連してゲノムdsRNAに結合することが示されており、nsp12による不連続転写にも寄与する可能性があります。 関連参考文献： PMID:34562452 PMID:35706445
• NSP15は2段階の反応を触媒します：2'-O転移エステル化による2',3'-環状リン酸の生成、続く加水分解による3'-リン酸の生成。 関連参考文献： PMID:33504779 PMID:33564093
• 複製酵素ポリタンパク質の構成要素として、NSP15は宿主細胞質内の複製オルガネラ（小胞体由来の二重膜小胞など）に局在し、そこでウイルスRNA合成が行われます（類似性に基づく、ポリタンパク質局在キーワードによる）。
• NSP15タンパク質はコロナウイルス間で保存されており、ウイルス複製と免疫回避における役割から、魅力的な抗ウイルス標的と考えられています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はNSP15領域内の合成ペプチド（YP_009724389.1のアミノ酸6600-6700）に対応しているため、この抗体はNSP15を認識すると期待されますが、感染細胞ライセート中の未処理のORF1abポリタンパク質も検出する可能性があります。ウエスタンブロット（WB）では、SARS-CoV-2感染細胞のライセートを使用し、適切な対照でバンドパターンを検証することを検討してください。
• ELISAでは、組換えNSP15タンパク質または免疫ペプチドを固定化し、コーティング条件と抗体希釈を最適化してください。これはポリクローナル抗体であるため、ロット間の一貫性を確認する必要があります。
• 他のコロナウイルスまたは宿主タンパク質との交差反応性は試験されていません。必要に応じて、特定の実験系で検証してください。

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