WB用抗SARS-CoV-2スパイクウサギポリクローナル抗体 - P0DTC2

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：SARS-CoV-2スパイクの機能と局在

• E2またはペプロマー（突起）タンパク質としても知られるSARS-CoV-2スパイク糖タンパク質（S）は、宿主細胞へのウイルス侵入を媒介するクラスIウイルス融合タンパク質であり、中和抗体の主要な標的です。
• Sタンパク質は、アンジオテンシン変換酵素2（ACE2）受容体に結合することでビリオンを宿主細胞に接着させ、感染を開始します。
  関連文献：
  PMID:32142651
  PMID:32155444
  PMID:33607086
• 代替的な侵入受容体にはニューロピリン1/2（NRP1/NRP2）およびインテグリンがあり、組織指向性に寄与します。例えば、NRP1/NRP2の利用により、ACE2発現量の低い嗅覚上皮細胞におけるウイルスの組織指向性が説明されます。
  関連文献：
  PMID:33082294
  PMID:33082293
  PMID:35150743
• 全長スパイク前駆体（約141 kDa）は、タンパク質分解によりS1およびS2サブユニットへとプロセシングされます。受容体結合後、TMPRSS2やカテプシンLなどの宿主プロテアーゼによるS2′切断が不可逆的な構造変化を引き起こし、ウイルス膜と細胞膜を融合させます。
  関連文献：
  PMID:32142651
  PMID:32703818
  PMID:34159616
  PMID:34561887
• Sタンパク質は、ビリオン膜、宿主の小胞体–ゴルジ体中間区画（ERGIC）膜、および宿主細胞膜に局在します。
• 主な構造的特徴には、N結合型糖鎖付加、パルミトイル化、膜貫通アンカー、ならびにジスルフィド結合によって安定化されたコイルドコイル型ヘプタッドリピートが含まれます。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原ペプチド（アミノ酸600～700）はS1/S2接合部にまたがるため、還元条件下では全長スパイク（約141 kDa）とS2サブユニットの両方を抗体が検出する可能性があります。ウェスタンブロットでは、還元および非還元SDS-PAGEの両方を試すことを検討してください。
• 免疫蛍光（IF/ICC）では、スパイクの局在（細胞表面か細胞内か）が発現状況に依存するため、対象の細胞株または組織に合わせて固定および透過化条件を最適化する必要があります。
• ELISAでは、本抗体を捕捉試薬または検出試薬として評価できます。モノクローナル抗スパイク抗体と組み合わせることで、アッセイの特異性が向上する可能性があります。
• 免疫沈降（IP）では、構造の完全性が結合に影響する可能性があるため、関連するサンプル系において本抗体が天然状態のスパイク複合体をプルダウンできることを検証してください。
• ドットブロット（DB）は迅速なスクリーニングツールとして利用できますが、確定的な解析には、ELISAなどの定量的方法と感度を比較する必要があります。
• SARS-CoV-2に対する交差反応性は確認されています。その他のコロナウイルス（例：SARS-CoV、MERS-CoV）由来のスパイクタンパク質に対する反応性は未確認であり、必要に応じて試験してください。

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