WB、DB、IF/ICC、IP、ELISA用抗SARS-CoV-2スパイクS2 ECD ウサギポリクローナル抗体 - P0DTC2

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：スパイク糖タンパク質(S)の機能と局在

• スパイク(S)糖タンパク質はクラスIウイルス融合タンパク質で、切断されてS1サブユニットとS2サブユニットに分かれます。S1は受容体結合ドメインを含み、S2はタンパク質を固定して膜融合を実行します。
• S1は宿主受容体ACE2に結合して感染を開始します。代替の侵入受容体としては、ニューロピリン-1(NRP1)、ニューロピリン-2(NRP2)、インテグリン、アシアロ糖タンパク質受容体1(ASGR1)があり、ACE2発現量が低い細胞におけるSARS-CoV-2の組織指向性に寄与している可能性があります。
  関連文献:
  PMID:32142651, PMID:32155444, PMID:33607086, PMID:33082294, PMID:33082293, PMID:35150743, PMID:34837059
• 宿主のTMPRSS2（細胞表面）またはカテプシンL（エンドソーム）によるS2'部位でのS2のタンパク質分解切断により、不可逆的な立体構造変化が引き起こされ、ウイルスエンベロープと宿主膜の融合が生じ、ウイルスゲノムが細胞質に放出されます。
  関連文献:
  PMID:32142651, PMID:32703818, PMID:34159616, PMID:34561887
• S2サブユニットにはヘプタッドリピート領域(HR1およびHR2)が含まれており、これらが折りたたまれて6本ヘリックスバンドルを形成し、融合のためにウイルス膜と細胞膜を近接させます。
• 亜細胞レベルでは、スパイクタンパク質はビリオン膜、宿主のER-ゴルジ中間区画(ERGIC)、および宿主細胞形質膜に局在します。
• スパイクは高度にN-グリコシル化およびパルミトイル化され、ジスルフィド結合を含み、スーパー抗原として機能します。また、宿主の自然免疫応答を抑制し、テザリンの作用を阻止します。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本抗体の免疫原はS2細胞外ドメイン(アミノ酸686-1214)全体に及び、融合ペプチドやヘプタッドリピートを含む保存された機能要素を網羅しています。この設計により、S1が脱落した後でもS2を検出することができます。
• ウエスタンブロットの場合、還元条件下で全長スパイクタンパク質は約141 kDaの位置に泳動されます。切断されたS2の場合、約70-80 kDaのバンドが観察されることがあります。使用する溶解およびサンプル調製条件を検証してください。
• 免疫蛍光/ICCでは、形質膜に加えて細胞内区画(ERGIC)に局在するスパイクを検出するため、透過処理工程を含めてください。
• キャプチャーELISAでは、本ポリクローナル抗体をS1サブユニットに対するモノクローナル抗体とペアリングして全長スパイクを特異的に測定するか、S2濃度を定量するための検出試薬として使用することをご検討ください。
• ドットブロット(DB)は、細胞ライセートや組換えタンパク質中の抗原発現を迅速にスクリーニングするために使用できます。抗原濃度と緩衝液条件を最適化してください。
• 免疫沈降(IP)ではスパイク複合体を捕捉できる可能性があります。非特異的結合を評価するため、適切な陰性対照を含めてください。

CamelBioについて：ワンストップ調達プラットフォーム

CamelBioは、診断薬メーカー、研究室、研究機関に対し、構想開発から臨床応用までの全段階を網羅した、IVD原材料・技術サービス・コンサルティングのワンストップアクセスを提供しています。SARS-CoV-2スパイクタンパク質の研究および血清学的アッセイ開発において、当社の調達プラットフォームは検証済みの抗体ペア、最適化されたポリクローナル抗体・モノクローナル抗体、大量の補助試薬を提供します。稀な標的の原材料が必要な場合でも、大規模製造のための安定供給が必要な場合でも、CamelBioがお客様のIVDニーズを橋渡しします。