WB、IF/ICC、IF-P、IHC-P、ELISA用 抗SDHBウサギモノクローナル抗体 - P21912

中核製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：SDHBの機能と局在

• SDHBは、コハク酸デヒドロゲナーゼ (SDH) の鉄硫黄 (Ip) サブユニット、別名ミトコンドリア呼吸鎖複合体IIをコードします。
• SDH複合体は、トリカルボン酸 (TCA) 回路においてコハク酸からフマル酸への酸化を触媒し、その鉄硫黄クラスターを介して電子をユビキノンに転移します (PubMed:26925370, PubMed:27604842)。 関連文献: PMID:26925370 PMID:27604842
• 本タンパク質は、電子伝達を仲介する[2Fe-2S]、[3Fe-4S]、[4Fe-4S]クラスターを配位します。
• SDHBは、その活性部位をマトリックス側に向けてミトコンドリア内膜に固定されています。
• コハク酸に加えて、SDHはリンゴ酸をエノール-オキサロ酢酸に酸化することができ、これは複合体の強力な阻害剤として作用します (By similarity)。
• アセチル化およびその他の翻訳後修飾はSDH活性を調節し、SDHBの変異は原発性ミトコンドリア病および遺伝性傍神経節腫/褐色細胞腫症候群と関連しています (UniProtキーワードに基づく: 疾患変異体、原発性ミトコンドリア病)。
• 本タンパク質は、宿主-ウイルス相互作用およびプロテオミクス同定の標的としても知られています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトSDHBのN末端領域 (aa 29–280) に及び、ミトコンドリア処理後の成熟タンパク質を含みます。抗体特異性はミトコンドリア画分または精製複合体IIで確認してください。
• ウェスタンブロッティングでは、SDHBは約31 kDaで移動します。還元条件下で実施し、分解を防ぐためにプロテアーゼ阻害剤の添加を検討してください。
• 免疫蛍光またはIHCでは、ミトコンドリア内膜にアクセスするために透過化処理が必要です。ミトコンドリアマーカーを用いて染色を検証してください。
• 本抗体はマウスおよびラットSDHBと交差反応します。他の種を使用する場合は配列相同性を確認してください。
• ELISAでは、サンドイッチアッセイを開発する場合、重複しないエピトープを標的とする検証済みの捕捉/検出システムと組み合わせてください。

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