WB、IF/ICC、ELISA用 Anti-SHC4 ポリクローナル抗体 - Q6S5L8

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：SHC4の機能と局在

• SHC-transforming protein 4 (SHC4)、別名RaLPまたはhShcDは、SHCアダプタータンパク質ファミリーの一員です。SH2ドメインとホスホチロシン結合ドメインを含み、活性化された受容体型チロシンキナーゼおよび下流エフェクターとの相互作用を仲介します。
• SHC4は、メラノーマにおいてRas依存性およびRas非依存性の両方の遊走経路を活性化し、腫瘍細胞の浸潤と転移に寄与します。
• シナプス後膜におけるアグリン誘導性CHRNB1（アセチルコリン受容体β1サブユニット）のチロシンリン酸化の初期段階に関与し、細胞外マトリックスシグナルをシナプス受容体クラスタリングに連結します。
• SHC4はシナプス後細胞膜に局在し、これはシナプスシグナリングおよびメラノーマ遊走におけるその役割と一致します。
• 組織発現は高度に制限されています：SHC4はメラノーマでのみ発現し、正常メラノサイトおよび良性母斑では弱い発現を示します。その発現は、放射状成長期から垂直成長期への移行期および転移性メラノーマにおいて強く増加し、遊走・浸潤能の獲得と相関します。
• 本タンパク質は選択的スプライシングを受け、そのアダプター機能を調節するリン酸化によって制御されます。
• SHC4の分子量は約69 kDaです。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原である組換えN末端フラグメント（aa 1-185）は、選択的スプライシングによって生じる複数のSHC4アイソフォームを検出する可能性があります。主要なバンドを同定するため、フルレンジラダーを使用することを検討してください。
• ウェスタンブロットでは、メラノーマ細胞株において69 kDa付近に顕著なバンドが期待されます。発現が制限されているため、陽性および陰性対照サンプルを使用して抗体特異性を検証してください。
• 免疫蛍光またはICCでは、膜またはシナプス局在を予想してください。膜マーカーとの共染色により特異性を確認できます。
• マウスとの交差反応性が報告されているため、マウスモデルでの有用性が示唆されますが、相同性を評価する必要があります。ご自身のサンプルシステムで反応性を確認するためのテストを行ってください。
• ELISAアッセイでは、コーティング抗原と抗体濃度の慎重な滴定が必要な場合があります。検出には間接ELISAフォーマットを検討してください。
• すべての適用において、適切なブロッキングおよび洗浄条件を使用してバンド特異性とS/N比を確認してください。最適でない結果が得られた場合は、抗体の滴定または抗原賦活化ステップが必要になる可能性があります。

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