WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用Anti-SIGLEC3/CD33ウサギポリクローナル抗体 - P20138

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：SIGLEC3/CD33の機能と局在

• CD33（Siglec-3、p67、gp67）は、1回膜貫通型のI型膜タンパク質であり、シアル酸結合免疫グロブリン様レクチン（Siglec）ファミリーに属します。N末端のVセットIg様ドメインと、2つの免疫受容体チロシンベース抑制モチーフ（ITIM）を含む細胞質尾部を特徴とします。
• CD33は抑制性受容体として機能します。シアル酸リガンドまたはC1qが結合すると、ITIMがLCKなどのSrc様キナーゼによってリン酸化され、チロシンホスファターゼPTPN6/SHP-1およびPTPN11/SHP-2がリクルートされ、免疫シグナルが下方制御されます（PubMed:10887109、10556798、10206955）。 関連文献： PMID:10887109、PMID:10556798、PMID:10206955
• α-2,3結合およびα-2,6結合シアル酸に優先的に結合し、α-2,6結合糖鎖に対してより高いアビディティを示します（PubMed:7718872）。 関連文献： PMID:7718872
• CD33による単球活性化の抑制作用には、ホスホイノシチド3-キナーゼ（PI3K）シグナル伝達が関与します（PubMed:15597323）。 関連文献： PMID:15597323
• 細胞内では、CD33は細胞膜およびペルオキシソームに局在します。
• 単球、マクロファージ、顆粒球など、単球系／骨髄系細胞系列の細胞に特異的に発現します。中枢神経系では、主にミクログリア細胞に存在します。
• キーワードから、細胞接着、免疫調節、選択的スプライシングにおける役割が示されており、糖タンパク質およびリン酸化タンパク質としての修飾も報告されています。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はヒトCD33のアミノ酸49～259（細胞外ドメイン）に相当し、シアル酸結合VセットIgドメインを含みます。この設計はネイティブな立体構造を標的とするため、フローサイトメトリー様のアプリケーション（IF/ICC）や免疫組織化学（IHC-P）における細胞表面発現CD33の検出に適しています。
• ウェスタンブロット（WB）では、予想されるタンパク質分子量は約40 kDaですが、グリコシル化により、観察されるバンドはより高い分子量に現れる場合があります。還元ゲルを使用し、適切な陽性対照（HL-60やTHP-1などの骨髄系細胞株）で検証することを推奨します。
• このポリクローナル抗体を免疫沈降またはELISAで使用する場合、ポリクローナル抗体であるため感度が向上する可能性がある一方、バックグラウンドが増加する可能性もあります。ブロッキングおよび洗浄条件の最適化を推奨します。
• マウスおよびラットとの交差反応性は、エピトープが保存されていることを示唆します。ただし、特定の実験条件では配列アラインメントを確認し、対象種でのバリデーションを行うことが不可欠です。
• IHC-Pでは、抗原賦活化処理（例：クエン酸緩衝液、pH 6.0）および組織固定条件を最適化する必要があります。エピトープのアクセシビリティは異なる場合があります。
• この抗体は、適合する抗体と組み合わせることで、サンドイッチELISAの捕捉または検出成分として使用できます。ユーザーは、各自の特定の緩衝液系における性能を確認してください。

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