WB、ELISA用抗SLC12A1ウサギポリクローナル抗体 - Q13621

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：SLC12A1の機能と局在

• SLC12A1は、溶質キャリアファミリー12に属する腎臓特異的なNa-K-2Cl共輸送体（NKCC2）をコードします。NKCC2は、ヘンレループの太い上行脚（TAL）の頂端膜を介して、ナトリウム、カリウム、塩化物イオンを電気的に中性の共輸送で移動させます。 関連文献： PMID:21321328
• NKCC2はTALにおける経上皮的なNaCl再吸収に不可欠であり、尿の濃縮および体液量の調節を促進します。また、ブメタニドなどのループ利尿薬の主要な標的です。
• この輸送体は、カリウムの代わりにアンモニウム（NH4+）を機能的に利用でき、髄質TALにおける頂端側へのNH4+分泌を促進します。この過程は、代謝性アシドーシス時の腎アンモニウム恒常性において重要です。
• SLC12A1の発現は腎臓に高度に特異的であり、タンパク質の局在は皮質および髄質の太い上行脚に存在する細胞の頂端細胞膜に限定されています。
• 翻訳後修飾にはN結合型グリコシル化およびリン酸化が含まれ、バソプレシンなどのホルモンシグナルに応じて、輸送体の細胞内輸送および活性を調節します。
• SLC12A1の変異は、低カリウム血症性アルカローシス、高カルシウム尿症、多尿を特徴とする塩喪失性腎疾患であるバーター症候群1型を引き起こします。これは、電解質バランスにおけるNKCC2の重要な役割を示しています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトSLC12A1の残基50～150に相当する合成ペプチドです。ヒト以外のサンプルを使用する場合は、エピトープの保存性を確認してください。ただし、マウスおよびラットとの交差反応性が報告されています。
• NKCC2（予測分子量約121 kDa）をウエスタンブロッティングで検出する場合は、低濃度のポリアクリルアミドゲル（例：6～8%）を使用し、長めの転写時間を設定することを検討してください。これにより、この大型でグリコシル化された膜タンパク質を効率的に転写できます。
• 溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を添加し、リン酸化依存的なバンドシフトを分離するためにホスファターゼ処理を検討してください。NKCC2はホルモン応答においてリン酸化により調節されます。
• ELISA用途では、免疫に使用したペプチドを用いた競合アッセイ設計、または組換え細胞外ドメイン断片を用いたキャプチャー形式が適している可能性があります。非特異的結合を最小限に抑えるため、コーティングバッファーおよびブロッキング条件を最適化してください。

CamelBio：ワンストップ調達の架け橋

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