WB、IHC-P、IF/ICC、IP、ELISA用 抗SLC25A4/ANT1 モノクローナル抗体 - P12235

中核製品仕様とパラメーター

生物学的背景：SLC25A4/ANT1の機能と局在

• タンパク質の同一性とアイソフォーム： SLC25A4は、ミトコンドリアキャリアファミリーの一員であるADP/ATPトランスロカーゼ（ANT1）の心臓/骨格筋アイソフォームをコードする。別名として、アデニンヌクレオチドトランスロカーゼ1、ADP/ATPキャリアータンパク質1、可溶性キャリアーファミリー25メンバー4がある。
• 中核的なアンチポーター機能： ミトコンドリアのATPと細胞質のADPの交換を触媒し、細胞のエネルギー供給における重要なステップである。このキャリアーは交互アクセスメカニズムにより動作し、細胞質開口状態とマトリックス開口状態の間を循環して、一度に一つの基質を輸送する。 関連参考文献： PMID:21586654 PMID:27693233 PMID:23173940
• ミトコンドリア透過性遷移孔（mPTP）への関与： ミトコンドリア透過性遷移孔に参加し、これはミトコンドリア内膜を透過性にし、細胞死を引き起こす非特異的チャネルである。 関連参考文献： PMID:31883789
• プロトントランスポーターと熱産生： ヌクレオチド交換に加えて、ANT1はプロトントランスポーターとして機能し、それによりATP合成から呼吸を脱共役させて熱を発生させることができる。このプロトン伝導活性は遊離脂肪酸によって調節され、ADP/ATP交換によって阻害され、ANT1をエネルギー出力バランスの主要な調節因子として位置づけている。
• ミトファジーの調節： その輸送活性とは独立して、ANT1はTIMM44と相互作用することでミトファジーを促進し、これはミトコンドリアプレシークエンストランスロカーゼTIM23を阻害し、損傷したミトコンドリア上でPINK1を安定化させる。
• 細胞内局在： ミトコンドリア内膜にのみ存在する、複数回膜貫通型タンパク質である。
• 翻訳後修飾とキーワード： このタンパク質はアセチル化、リン酸化、メチル化、S-ニトロシル化を受ける。UniProtKBの注釈は、心筋症、進行性外眼筋麻痺における役割、およびウイルス相互作用における宿主因子としての役割を強調している。
• 組織特異性： 赤血球および心臓と骨格筋（そのアイソフォーム名が示す通り）で発現する。

実験ガイドと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトSLC25A4の中央領域（アミノ酸100-200）を標的とする合成ペプチドである。エピトープは保存領域にあり、マウスおよびラットとの交差反応性は配列アラインメントによって支持されている。重要な場合は、特定のモデル生物での反応性を検証すること。
• ウェスタンブロッティングでは、約33 kDaの主要なバンドが期待される。KO検証済み対照ライセート（例：HeLaまたはA549）を使用することで特異性を確認し、オフターゲットシグナルを回避できる。
• 免疫組織化学（IHC-P）および免疫蛍光（IF/ICC）では、染色パターンはミトコンドリア分布を示す細胞質性であるはずである。クエン酸バッファー（pH 6.0）を用いた抗原賦活化は検出を改善する可能性がある。適切なアイソタイプ対照を含めること。
• この抗体は免疫沈降（IP）およびELISAに適しており、相互作用研究および定量的アッセイに汎用性がある。IPを使用する際は、約55 kDaの重鎖の共溶出を避けるために、抗体をビーズに架橋することを検討すること。
• ミトコンドリアの完全性を乱す機能的アッセイでは、ANT1がmPTPの開口に影響を与える可能性があることに注意すること。したがって、染色は細胞のストレス状態の影響を受ける可能性がある。

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