IHC-P・ELISA用 抗SPARC ウサギポリクローナル抗体 - P09486

主な製品仕様・パラメータ

生物学的背景：SPARCの機能と局在

• SPARC（Secreted Protein Acidic and Rich in Cysteine）はオステオネクチンまたはBM-40とも呼ばれるマトリセルラー糖タンパク質で、細胞-マトリックス相互作用を調節し、細胞増殖を制御しています。
• カルシウムイオンや銅イオンに結合し、コラーゲン、トロンボスポンジン、アルブミンをはじめとする様々な細胞外マトリックス成分や、PDGFなどの増殖因子、細胞膜と相互作用します。
• SPARCは2つのカルシウム結合ドメインを持っています：5～8個のCa²⁺イオンが結合する低親和性酸性ドメインと、高親和性EFハンドモチーフです。
• 本タンパク質は細胞外空間に分泌され、基底膜の構成成分の1つであり、組織リモデリングや修復における役割と整合しています。
• 複数のジスルフィド結合、グリコシル化が特徴であり、変異が生じると骨形成不全症と関連することが知られています。
• SPARCは直接タンパク質配列決定やプロテオミクス手法によって同定されており、その存在量と臨床的関連性が裏付けられています。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体の免疫原は、成熟SPARCタンパク質（残基18～303）を含み、両方のカルシウム結合ドメインをカバーしています。コンフォメーション依存性エピトープを保護するため、IHC-Pでは抗原賦活化処理とブロッキング工程を考慮してください。
• ELISAでは、ジスルフィド結合の完全性を維持する条件で抗原を固相化し、必要に応じて他のマトリセルラータンパク質に対する交差反応性を評価してください。
• ヒト、マウス、ラットの組織を染色する場合、ポリクローナル抗体はロット間でばらつきが生じる可能性があるため、陽性対照と陰性対照を設けて、対象の種において抗体を検証してください。
• 開始濃度として、IHC-Pでは1:50～1:500、ELISAでは1:1000～1:5000の範囲で希釈率を試験することを推奨します。使用する検出システムと検体の種類に応じて最適化してください。

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