WB、ELISA用抗SQSTM1ウサギポリクローナル抗体 - Q64337

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：SQSTM1の機能と局在

• SQSTM1はsequestosome-1またはp62としても知られ、ユビキチン化タンパク質凝集体とオートファジー機構を連結することで選択的オートファジー受容体として機能する、ストレス誘導性の細胞質アダプタータンパク質です。
• オートファジー貨物の認識：選択的オートファジー受容体として、SQSTM1はユビキチン化された貨物をオートファゴソームへ橋渡しします。UBAドメインを介してユビキチン化タンパク質に結合すると液-液相分離を起こし、p62ボディを形成します。これらはLIRモチーフとATG8ファミリータンパク質との相互作用を介してオートファゴソームへ動員され、貨物のオートファジー分解につながります。 関連文献： PMID:25723488、PMID:33397898
• 細胞保護シグナル伝達：SQSTM1はKEAP1と相互作用し、KEAP1を封入体へ隔離することで、KEAP1を介したNFE2L2/NRF2の分解を阻止します。これによりNRF2が核に蓄積し、抗酸化遺伝子および細胞保護遺伝子の発現が誘導されます。 関連文献： PMID:20173742、PMID:20421418、PMID:24011591
• NF-κB経路の制御：SQSTM1はTRAF6とCYLDの相互作用を媒介するアダプターとして機能し、TNF、NGF、インターロイキン-1などのサイトカインに応答したNF-κBの活性化に影響を与えます。 関連文献： PMID:14960283、PMID:18382763
• 細胞内局在：SQSTM1は、細胞質凝集体（p62ボディ）、オートファゴソーム、後期エンドソーム、リソソーム、核（PMLボディ）に局在します。また、小胞体および筋原線維サルコメアにも存在し、タンパク質品質管理とシグナル伝達における多様な機能を反映しています。
• 翻訳後修飾および構造的特徴：このタンパク質はアセチル化、リン酸化、ユビキチン化、パルミトイル化を受け、ジンクフィンガードメインを含みます。これらの修飾は、その活性、局在、安定性を制御します。
• 組織分布：SQSTM1は組織全体で広く発現しており、細胞の恒常性維持およびストレス応答における基本的な役割と一致しています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はマウスSQSTM1のアミノ酸250～350に対応しており、PB1ドメインの一部およびリンカー配列を含む可能性があります。この抗体はポリクローナル抗体であるため、複数のエピトープを認識する可能性があり、ウエスタンブロット（WB）で強いシグナルが得られます。
• WBでは48 kDa付近にバンドが予測されますが、SQSTM1は凝集体を形成しやすく、翻訳後修飾も受けるため、より高分子量の分子種が現れる場合があります。凝集を最小限に抑えるには、電気泳動前に還元条件のサンプルローディングバッファー中でサンプルを加熱してください。
• ELISAでは、組換えSQSTM1タンパク質または免疫ペプチドを固相化抗原として使用することを検討してください。最適なシグナル対ノイズ比を得るため、抗体と抗原の両方を滴定することが推奨されます。
• ヒト、マウス、ラットとの交差反応性は配列相同性によって支持されていますが、使用する具体的なサンプルおよびアプリケーションで個別に検証することを推奨します。

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