WB、IHC-P、IP、ELISA用 抗STIM1 ウサギ PolymAb® - Q13586

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：STIM1の機能と局在

• STIM1は、細胞膜上の2つの主要な内向き整流性Ca²⁺チャネル、Ca²⁺放出活性化Ca²⁺（CRAC）チャネルとアラキドン酸調節性Ca²⁺選択性（ARC）チャネルを制御するCa²⁺センサーとして機能し、カルシウム恒常性において中心的な役割を果たします。 関連参考文献: PMID:15866891 PMID:16005298 PMID:16208375

• 小胞体（ER）のCa²⁺貯蔵が枯渇すると、STIM1はオリゴマー化し、ER膜からER-細胞膜接合部へ移行し、そこで直接ORAI1、ORAI2、ORAI3 CRACチャネルサブユニットを活性化して、持続的かつ振動的なCa²⁺流入を引き起こします。 関連参考文献: PMID:16537481 PMID:32415068

• STIM1はエナメル質形成に関与しており、組織特異的な石灰化プロセスにおけるその役割を浮き彫りにしています。 関連参考文献: PMID:24621671

• このタンパク質は、シグナル伝達アダプターSTINGを小胞体に保持することでI型インターフェロン応答を負に調節し、その活性化と下流の免疫シグナル伝達を阻害します。 関連参考文献: PMID:30643259

• STIM1は様々なヒト初代細胞および腫瘍細胞株に遍在的に発現しており、細胞生理学におけるその基本的な役割を裏付けています。

• 細胞内では、STIM1は細胞膜、小胞体膜、細胞質、細胞骨格、筋小胞体に局在しており、その動的なシャトリング機能と一致しています。

• 翻訳後修飾には、その安定性と活性を調節する可能性のあるN結合型グリコシル化とリン酸化が含まれます。このタンパク質は、シグナルペプチド、単一の膜貫通ヘリックス、および細胞質側のコイルドコイルドメインを含みます。

• 選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成され、組織特異的な発現や異なる機能特性を示す可能性があります。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はアミノ酸530–685にまたがり、これはSTIM1の細胞質側C末端セグメント内の領域です。この設計は、全長タンパク質および特定のスプライスバリアントの検出に適している可能性がありますが、この領域を欠くアイソフォームは検出できない場合があります。対象となる細胞株または組織で検証してください。

• ウェスタンブロッティングでは、77 kDa付近の主要なバンドが期待されますが、グリコシル化や選択的スプライシングにより追加のバンドが現れる場合があります。適切なローディングコントロールを使用し、陰性コントロール（例：siRNAノックダウンまたはCRISPRノックアウト、利用可能な場合）で特異性を確認してください。

• 免疫組織化学（IHC-P）では、STIM1の細胞内局在は透過処理を必要とする可能性があるため、抗原賦活化法と抗体希釈率の最適化が必要です。適切なアイソタイプコントロールを含め、既知の陽性および陰性組織を用いて染色を検証してください。

• 免疫沈降（IP）では、効率的な捕捉のために抗体をプロテインA/Gビーズと事前にインキュベートし、下流のWBでの重鎖/軽鎖干渉を防ぐために架橋を検討してください。ORAI1などの既知の相互作用パートナーの共沈降を確認してください。

• ELISAでは、最適なコーティングおよび検出条件を決定するために、免疫原または細胞溶解物に対する抗体の滴定を行ってください。サンドイッチELISAのセットアップでは、対応する検出抗体または標識二次抗体と組み合わせてください。

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