ウエスタンブロット、IF/ICC、ELISA用 抗SUMO3ウサギポリクローナル抗体 - P55854

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：SUMO3の機能と局在

• SUMO3 (Small Ubiquitin-related Modifier 3) は、SUMO3遺伝子 (GeneID: 6612) によってコードされるユビキチン様タンパク質です。SUMOファミリーの一員であり、SMT3A、Smt3B、SMT3H1、またはSUMO-2としても知られています。
• ユビキチンとは異なり、SUMO3は主に翻訳後修飾因子として機能し、タンパク質を分解へと標的化するのではなく、むしろユビキチン依存的なプロテアソーム分解を拮抗する可能性があります。単量体またはポリマーとして標的リシン残基に共有結合的に付加されます。
• この結合過程には、E1活性化酵素 (SAE1-SAE2)、E2結合酵素 (UBE2I) が必要であり、PIAS1-4、RANBP2、CBX4などのE3リガーゼによって促進されます。 関連参考文献: PMID:11451954, PMID:18538659, PMID:21965678
• SUMO3は、核輸送、DNA複製と修復、有糸分裂、シグナル伝達に参加します。また、SETXのスモイ化の調節にも重要です。 関連参考文献: PMID:24105744
• 細胞内局在としては、SUMO3は細胞質、核、およびPML核小体に存在します。
• 主に肝臓で発現しており、予測分子量は11.6 kDa (SDS-PAGEでは約12 kDaで移動) です。
• UniProtキーワードには、3D構造、選択的スプライシング、イソペプチド結合、プロテオミクス同定、Ubl結合経路が含まれます。

実験ガイドと技術的ヒント

• SUMO3の分子量が小さい (~12 kDa) ため、ウエスタンブロットで最適な分解能を得るには15% SDS-PAGEゲルまたはグラジエントゲルを使用し、低分子量カットオフのPVDF膜への効率的な転写を確保してください。
• 免疫蛍光法 (IF/ICC) では、細胞を4%パラホルムアルデヒドで固定し、0.1-0.2% Triton X-100で透過処理を行い、抗体が核およびPML小体に局在するSUMO3にアクセスできるようにします。
• 関連する細胞株または組織で抗体の特異性を検証してください。SUMO3は肝臓で高発現しているため、HepG2細胞や初代肝細胞が陽性対照として使用できる可能性があります。
• このポリクローナル抗体は遊離型と結合型の両方を認識する可能性があるため、ELISAでは非特異的結合を減らすために1% SDSや他の変性条件の使用を検討してください。

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