WB、IP、IF、FC、ELISA用抗Sykモノクローナル抗体 - P43405

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：Sykの機能と局在

• SYKは非受容体型チロシンキナーゼであり、自然免疫および獲得免疫、細胞接着、破骨細胞成熟、血小板活性化、血管形成を調節する。 関連文献: PMID:12387735, PMID:33782605
• B細胞成熟、特に前駆B細胞から前B細胞への移行に必須であり、BCR刺激時にBLNKやBTKなどの主要なアダプタータンパク質をリン酸化する。 関連文献: PMID:12456653
• VAV1、PLCG1、PI-3キナーゼ、LCP2、BLNKなどの直接的下流エフェクターをリン酸化し、免疫シグナルを伝達する。 関連文献: PMID:12456653, PMID:15388330, PMID:34634301
• 自然免疫において重要な役割を果たし、CLEC7Aなどの受容体を介して真菌、細菌、ウイルス病原体への応答を仲介し、インフラマソームおよびNF-κB経路を活性化する。
• インテグリンを介した細胞接着および血小板活性化に必要であり、フィブリノゲンによって活性化されるITGB3などの受容体からのシグナルを中継する。 関連文献: PMID:12387735
• 好中球を含む造血細胞およびB細胞発生の全段階（前駆B細胞から形質細胞まで）で広く発現している。細胞膜および細胞質に局在する。 関連文献: PMID:8163536
• 2つのSH2ドメインとATP結合キナーゼドメインを含む。キーワードは血管新生と宿主-ウイルス相互作用における役割を強調している。

実験ガイドと技術的ヒント

• 免疫原はアミノ酸251-350（内部領域）にわたるため、この抗体はリン酸化状態に関わらず全SYKを検出することが期待される。
• ウェスタンブロットでは、約72 kDa付近にバンドが検出される。陽性コントロールとしてB細胞株または脾臓全組織ライセートの使用を検討のこと。マウスおよびラットとの交差反応性により、多種間研究が可能。
• 免疫沈降では、ライセートを前洗浄することでバックグラウンドを低減できる可能性がある。特定の実験条件に合わせて溶出条件を最適化すること。
• 免疫蛍光法および細胞内フローサイトメトリーでは、透過化処理を含めること。エピトープへのアクセス性を保持するため、固定・透過化プロトコルを検証すること。
• 本抗体はELISAにも適している。サンドイッチELISA開発のためには、SYK検出抗体とのペアリングを検討のこと。

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