WB、IF/ICC、ELISA用 抗TFAM ウサギポリクローナル抗体 - Q00059

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：TFAMの機能と局在

• TFAM (Transcription Factor A, Mitochondrial)は、MtTF1、TCF-6、TCF6L2としても知られ、ミトコンドリア遺伝子発現を調節する核コードの主要なミトコンドリア転写因子です。
• TFAMはTFB2MおよびPOLRMTと共にミトコンドリア転写開始複合体を形成し、ミトコンドリアDNA (mtDNA)の基礎的転写に必須です。
  関連文献: PMID:29149603
• TFAMは軽鎖プロモーターおよびHSP1プロモーターに結合し、そのHMGボックスドメインを介してDNAをUターン状に曲げ、POLRMTをリクルートして転写開始を促進します。
  関連文献: PMID:22037172, PMID:1737790
• 転写以外に、TFAMはmtDNAの維持とパッケージングに極めて重要です。mtDNAをヌクレオイドに凝縮し、その量はmtDNAコピー数を厳密に調節します。
  関連文献: PMID:19304746, PMID:22841477, PMID:22037171
• TFB2Mと協働して、TFAMはプロモーターの開放およびDNA非鋳型鎖の捕捉を可能にし、正確な転写のための重要なステップを担います。
  関連文献: PMID:20410300
• TFAMはミトコンドリアマトリックスおよびヌクレオイドに局在し、mtDNAの解きほぐしと組織化にも役割を果たします。
• 選択的スプライシングとリン酸化を受けます。疾患関連バリアントは原発性ミトコンドリア病に関連しています。
• HMGBファミリーの一員として、TFAMはそのタンデムHMGボックスを用いてmtDNAに結合、曲げ、ループ形成を行い、ヌクレオイド構造に寄与します。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトTFAMのN末端1–220領域に対応しており、タンデムHMGボックスドメインを含むため、この抗体はフルレングスのTFAMを認識することが期待されます。
• ウェスタンブロッティングでは、最適な検出のためにミトコンドリア濃縮リシートを使用することを検討してください。予測分子量は約29 kDaですが、翻訳後修飾によりシフトする可能性があります。
• 免疫蛍光(IF)およびICCでは、ミトコンドリアの点状染色パターンが予想されます。局在を確認するためにミトコンドリアマーカーとの共染色をお勧めします。
• ELISAを行う場合は、組換えTFAMまたは細胞リシートに対して抗体を滴定し、最適な作業希釈率を確立してください。
• ヒト、マウス、ラット間で配列保存性が高いため、交差反応性が高い可能性がありますが、ご自身のモデルシステムで抗体を検証してください。

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