WB、IF-P、IHC-P、ELISA用 抗TGF beta 1 モノクローナル抗体 - P01137

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: TGF beta 1の機能と局在

• TGFB1は、トランスフォーミング増殖因子β-1前駆体タンパク質をコードし、プロテオリティックに切断されて、レイテンシー関連ペプチド (LAP) と生物学的に活性なTGF-β-1サイトカインが生成されます。
• TGF-β-1は不活性な潜在型複合体として分泌されます。インテグリン (ITGAV:ITGB6 または ITGAV:ITGB8) がLAPに結合して構造的歪みを引き起こし、活性型サイトカインが放出されることで活性化が起こります (PubMed:22278742, PubMed:28117447)。 関連文献: PMID:22278742 PMID:28117447
• 活性型TGF-β-1は、TGF-β受容体 (TGFBR1およびTGFBR2) を介してシグナルを伝達し、SMAD2/3のリン酸化と核内移行を引き起こして遺伝子発現を調節します (PubMed:20207738, PubMed:25893292, PubMed:29483653, PubMed:30696809)。 関連文献: PMID:20207738 PMID:25893292 PMID:29483653 PMID:30696809
• これは多機能性サイトカインであり、CREB3L1の活性化を介して、上皮間葉転換 (EMT)、細胞遊走、持続的なコラーゲン産生を誘導することができます (PubMed:25310401, PubMed:25893292, PubMed:30696809)。 関連文献: PMID:25310401 PMID:25893292 PMID:30696809
• TGF-β-1は免疫細胞の分化を調節します：高濃度では制御性T細胞 (Treg) の分化を促進し、低濃度でIL-6/IL-21と共存するとTh17細胞の分化を支持します (類似性による)。
• 骨では高発現しており、骨芽細胞による骨形成、走化性、増殖、分化の強力な刺激因子として作用します。また、関節軟骨に豊富に存在し、変形性関節症で増加します (PubMed:11746498, PubMed:17827158)。 関連文献: PMID:11746498 PMID:17827158
• 主な細胞内局在は細胞外空間および細胞外マトリックスです。
• 翻訳後修飾には、ジペプチド残基での切断、ジスルフィド結合の形成、グリコシル化が含まれ、これらは正しいフォールディングと二量体化に不可欠です。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原 (ヒトTGFB1前駆体タンパク質のアミノ酸279–390) はLAPドメイン内に存在するため、この抗体は全長前駆体タンパク質およびLAPを認識する可能性がありますが、成熟TGF-β1二量体を必ずしも認識するとは限りません。適切な組換えタンパク質または細胞溶解物を用いて検出特異性を検証してください。
• ウェスタンブロットでは、還元条件下で前駆体タンパク質に対応する約44 kDaのバンドが期待されます。成熟モノマー (~12.5 kDa) は、エピトープへのアクセシビリティに応じて観察される場合とされない場合があります。
• 免疫組織化学および免疫蛍光では、特に潜在型複合体が蓄積する細胞外マトリックスに富む組織 (例：骨、軟骨) を扱う際に、抗原賦活化条件と固定方法を考慮してください。
• ELISAの性能は、組換えLAPまたは前駆体タンパク質をコーティングし、抗体の連続希釈系列をテストすることで評価できます。
• マウスおよびラットとの交差反応性が報告されていますが、使用する特定の実験系での結合を確認することを推奨します。

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