Anti-TGF beta Receptor II (TGFBR2) Rabbit Polyclonal Antibody for WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P37173

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：TGF-β受容体タイプ2の機能と局在

• 受容体の同一性と構造： TGF-β受容体タイプ2（TGFBR2）は、TGF-βサイトカインTGFB1、TGFB2、およびTGFB3に対する高親和性受容体として機能する、シングルパス型I膜貫通セリン/スレオニンキナーゼです。ヒト第3染色体上のTGFBR2遺伝子によってコードされ、選択的スプライシングによって複数のアイソフォームが生成されます。その一部は、遺伝性非ポリポーシス大腸癌、大動脈瘤、および頭蓋早期癒合症と関連しています。
• 正統なSMAD依存性シグナル伝達： リガン ド結合により、TGFBR2は2つのタイプI受容体（TGFBR1）と対になってヘテロ四量体複合体を形成します。TGFBR2の構成的に活性なキナーゼドメインがTGFBR1をリン酸化し、TGFBR1は順にSMAD2およびSMAD3を活性化します。リン酸化されたSMADはSMAD4と複合体を形成して核に移行し、TGF-β標的遺伝子の転写を調節して、細胞周期停止、アポトーシス、分化、および細胞外マトリックスの産生を制御します。
• 非正統的シグナル伝達： 正統的なSMAD経路に加えて、TGFBR2は、MAPキナーゼ、PI3K/AKT、およびRho様GTPase経路を含むSMAD非依存性カスケードに関与し、細胞移動、増殖、および生存を調節します。
• リガンド結合と親和性： TGFBR2は、補助受容体を必要とせずに、ピコモル範囲の親和性でTGFB1、TGFB2、およびTGFB3に結合し、TGF-βシグナル伝達の初期段階を仲介します。
• 細胞内局在： TGFBR2は主に細胞膜と膜ラフトに局在しますが、細胞外環境で分泌型が検出された証拠があり、これは細胞間コミュニケーションにおけるその役割と一致しています。
• 翻訳後修飾： この受容体は糖タンパク質であり、三次構造に不可欠な多数の分子内ジスルフィド結合を含んでいます。キナーゼドメインおよび細胞質テール内のセリンおよびスレオニン残基でリン酸化を受け、これが活性および下流のシグナル伝達を調節します。
• キーワードの概要： UniProtレコードは、アポトーシス、成長調節、分化への関与、および大動脈瘤、頭蓋早期癒合症、遺伝性非ポリポーシス大腸癌を含む疾患との関連を強調しています。

実験的ガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原の設計： この抗体は、ヒトTGFBR2のアミノ酸23〜280を含む組換えタンパク質を用いて作成されました。この領域はN末端細胞外リガンド結合ドメインをカバーしています。この領域はヒト、マウス、ラット間で比較的保存されているため、観察された交差反応性を説明しています。ただし、内在性の糖鎖修飾パターンがネイティブサンプルにおけるエピトープのアクセシビリティに影響を与える可能性があります。
• ウェスタンブロット（WB）の考慮事項： TGFBR2の予測分子量は約65 kDaですが、糖鎖修飾により、バンドのシフトが観察される場合があります。明確な分解能のために還元条件を使用してください。TGFBR2を発現することが知られているポジティブコントロールライセート（例：HeLa、A549）で検証してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）のヒント： パラフィン包埋切片の場合、抗原回収（例：クエン酸バッファーpH 6.0またはEDTA pH 9.0）を最適化し、一次抗体の複数の濃度（典型的な範囲1:50〜1:500）をテストすることを検討してください。膜染色が期待されます。ブロッキングバッファーにホスファターゼ阻害剤を含めると、リン酸化依存性エピトープの保持に役立つ場合があります。
• 免疫蛍光（IF/ICC）のガイダンス： TGFBR2は膜貫通受容体であるため、細胞内エピトープの検出にはTriton X-100またはサポニンによる透過処理が必要です。局在を確認するために、膜またはオルガネラマーカーとの二重染色を推奨します。この抗体は分泌型も認識する可能性があるため、細胞外の背景を避けるために慎重な固定が推奨されます。
• ELISAの使用法： このポリクローナル抗体は、サンドイッチELISA形式でキャプチャーまたは検出試薬として使用できます。最適なコーティング（1〜10 µg/mL）および検出濃度を決定するためにチェッカーボード滴定を実行し、組換えTGFBR2タンパク質標準で検証してください。

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