WB、ELISA用 抗TIGIT ウサギポリクローナル抗体 - Q495A1

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：TIGITの機能と局在

• TIGIT (T-cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains) は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属する抑制性受容体であり、VSIG9、VSTM3、またはWUCAMとも呼ばれます。細胞外VセットIg様ドメイン、膜貫通ヘリックス、細胞質内ITIMモチーフを含みます。
• T細胞およびNK細胞応答の主要な負の調節因子として機能します。成熟した免疫調節性樹状細胞の生成を促進することでT細胞活性化を抑制します。 関連参考文献: PMID:19011627
• 抗原提示細胞上のリガンドPVR/CD155またはNECTIN2/CD112に結合すると、TIGITはSrcキナーゼFYNまたはLCKによってリン酸化され、GRB2およびSHIP1/INPP5Dのリクルートを引き起こし、それに続くPI3KおよびMAPKシグナル伝達経路の抑制をもたらします。 関連参考文献: PMID:23154388
• 別の抑制メカニズムとして、TIGITはベータアレスチン-2と会合してSHIP1をリクルートし、TRAF6の自己ユビキチン化を抑制してNF-κBシグナル伝達経路を阻害します。 関連参考文献: PMID:24817116
• また、NECTIN4の受容体としても機能し、これを通じてNK細胞の細胞傷害性を抑制します。 関連参考文献: PMID:32503945
• シングルパス型I膜タンパク質として細胞膜に局在します。
• 末梢記憶および制御性CD4+ T細胞とNK細胞上で低レベルで発現し、これらの細胞が活性化されると発現が上方制御されます。
• 翻訳後修飾には、リガンド結合時のITIMモチーフのリン酸化が含まれます。キーワード：リン酸化タンパク質、糖タンパク質、ジスルフィド結合、選択的スプライシングに分類されます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原（アミノ酸22–141）は、細胞外Ig様ドメイン全体を含み、単量体およびリガンド結合型TIGITの両方を検出できる可能性があります。
• ウェスタンブロッティングでは、予測されるタンパク質分子量は約26 kDaです。還元SDS-PAGE条件の使用と、活性化T細胞またはNK細胞ライセートなどの適切な陽性対照の包含を検討してください。
• ELISAアプリケーションでは、組換え免疫原または全長TIGITタンパク質をコーティングすることで有益な場合があります。利用可能であれば、TIGITノックダウンまたはノックアウト細胞株を使用して特異性を検証してください。
• この抗体はマウスTIGITと交差反応するため、免疫チェックポイント研究のためのマウスモデルでの使用を検討できます。定量的実験の前に、関連するサンプル系で滴定と検証を行ってください。

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