ウエスタンブロット、IHC-P、ELISA用 抗TIM-3/HAVCR2 ウサギポリクローナル抗体 - Q8TDQ0

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: TIM-3/HAVCR2の機能と局在

• TIM-3 (Hepatitis A virus cellular receptor 2) は、免疫グロブリンスーパーファミリーおよびTIMファミリーに属するI型膜貫通タンパク質であり、T-cell immunoglobulin and mucin domain-containing protein 3 (TIMD-3)、CD366としても知られる。
• 主にT細胞上の抑制性免疫チェックポイント受容体として機能し、TCRシグナルを減衰させ、T細胞疲弊を促進する。Th1を介した自己および同種免疫応答を抑制し、免疫学的寛容に寄与する (PMID:14556005)。
  関連文献: PMID:14556005
• ガレクチン-9 (LGALS9) の受容体として作用し、T細胞のアポトーシスを誘導し、エフェクター機能を抑制するが、この相互作用については議論がある (PMID:16286920, PMID:24337741, PMID:23555261)。
  関連文献: PMID:16286920 PMID:24337741 PMID:23555261
• カルシウム依存的にホスファチジルセリン (PtSer) にも結合し、アポトーシス細胞の貪食を媒介し、特に樹状細胞やマクロファージにおける自然免疫を調節する (PMID:24825777)。
  関連文献: PMID:24825777
• 様々な免疫細胞サブセット（Th1リンパ球、制御性T細胞 (Tregs)、樹状細胞、自然殺傷 (NK) 細胞）および上皮組織に発現している。HCVやHIVなどの慢性ウイルス感染症では発現が上昇し、免疫疲弊に寄与する。
• 自然免疫における二重の役割を果たす：NK細胞上では、LGALS9への応答としてIFN-ガンマ産生を増強する (PMID:22323453)、またはNK細胞媒介性細胞傷害を抑制する (PMID:22383801)。
  関連文献: PMID:22323453 PMID:22383801
• 翻訳後修飾（グリコシル化、パルミトイル化、リン酸化）を受ける。ジスルフィド結合と、リガンド結合に必須のIg様V型ドメインを特徴とする。
• 細胞内局在：主に細胞膜上および細胞間接着部に存在し、免疫シナプス形成とシグナル伝達に関与する。

実験ガイドと技術的ヒント

• 免疫原は細胞外ドメイン (aa22-202) に対応する組換えタンパク質であり、ウエスタンブロット、IHC-P、ELISAにおいて天然および変性したTIM-3を検出するのに適している。
• ウエスタンブロット解析では、還元条件下で、Jurkat細胞または活性化した初代T細胞の全細胞溶解物を使用し、約33 kDaの予想されるバンドを確認することを検討されたい。ただし、グリコシル化により見かけの分子量が高くなる可能性がある。
• IHC-Pでは、抗原賦活化法（例：クエン酸緩衝液、pH 6.0）が必要な場合がある。ヒト扁桃またはリンパ節組織における染色パターンを、適切な陰性対照とともに検証すること。
• ELISAでは、本抗体を捕捉試薬または検出試薬として検討できる。コーティングした組換えTIM-3と既知の陽性サンプルを用いて、チェッカーボード滴定を行うこと。
• マウスおよびラットとの交差反応性が報告されているため、免疫原領域の種間における配列相同性を確認し、関連するげっ歯類モデル（例：マウス脾臓溶解物、ラット組織切片）で抗体を検証することを検討されたい。

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