WB、IP、IF/ICC、ELISA用 抗TNF-α ウサギモノクローナル抗体 - P01375

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景: TNF-αの機能と局在

• 腫瘍壊死因子 (TNF-α) は、キャシェクチンとしても知られ、主にマクロファージによって分泌される多機能性サイトカインであり、腫瘍壊死因子リガンドスーパーファミリー (TNFSF2) に分類される。
• その受容体 TNFRSF1A/TNFR1 および TNFRSF1B/TNFBR への結合により、細胞死、生存、炎症反応を調節する。
• TNF-αは強力な発熱物質であり、直接またはインターロイキン-1の分泌を介して発熱を誘導し、悪液質の誘導に関与する。
• 関節リウマチにおいて、タンパク質ホスファターゼ1 (PP1) をアップレギュレーションすることで制御性T細胞 (Treg) の機能を損ない、PP1がFOXP3のSer-418を脱リン酸化し、Tregを機能的に欠陥状態にする。 関連参考文献: PMID:23396208
• 膀胱がん細胞におけるBCG刺激好中球とDIABLO/SMAC模倣薬の併用による抗がん作用において、細胞死の主要なメディエーターとして働く。 関連参考文献: PMID:16829952, PMID:22517918, PMID:23396208
• TNF-αは、IL1BおよびIL6と相乗的にVEGF産生を誘導することで、血管新生を促進する。 関連参考文献: PMID:12794819
• 細胞内局在に関して、TNF-αは細胞膜上で膜貫通型タンパク質として存在し、切断されて分泌型となる。膜型および分泌型の両方が検出される。
• キーワード: サイトカイン、糖タンパク質、リポタンパク質、ジスルフィド結合、リン酸化タンパク質、リファレンスプロテオーム。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は細胞外ドメイン (aa 77-233) に対応するため、本抗体はTNF-αの膜貫通型および切断された可溶型の両方を検出する可能性がある。
• ウェスタンブロットでは、サンプル調製方法に応じて、約26 kDa (全長) または17 kDa (切断型) 付近のバンドが観察される可能性がある。還元条件下での使用を推奨する。
• 免疫沈降では、抗体が天然構造と適合することを確認すること。適切な細胞溶解バッファーの使用を検討する。
• ELISAおよび免疫蛍光法では、特異性を確保するために適切な細胞系 (例: LPS刺激マクロファージ) で検証する。

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