WBおよびELISA用抗TOP2A（DNAトポイソメラーゼIIα）ウサギポリクローナル抗体 - P11388

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：DNAトポイソメラーゼIIαの機能と局在

• DNAトポイソメラーゼ2-α（TOP2A）は、DNA複製、転写、染色体分離の際に重要な、超らせん化、カテネーション、デカテネーションなどのDNAトポロジー上の問題を解消するために不可欠な核内酵素です。 関連文献： PMID:17567603、PMID:18790802、PMID:22013166
• TOP2Aはホモ二量体を形成し、ATP依存的に、ある二本鎖DNAセグメントを別の二本鎖DNAに一時的に生じた切断部位を通過させます。これにより、切断・再結合機構を介してDNAトポロジーを変化させます。
• II型DNAトポイソメラーゼファミリーに属し、真核生物間で高度に保存されています。βアイソフォームであるTOP2Bと相同性を共有しますが、発現パターンおよび機能的役割は異なります。
• 主に核内に局在し、核質および核小体に存在します。また、特定の細胞周期段階では細胞質にも検出されます。
• 翻訳後修飾にはアセチル化、リン酸化、ユビキチン化が含まれ、これらはタンパク質の安定性、酵素活性、染色体への結合を調節します。
• 扁桃、脾臓、リンパ節、胸腺、精巣などのさまざまな正常組織で発現し、増殖細胞で高発現します。また、高悪性度リンパ腫や扁平上皮性肺腫瘍を含む多くのがんで発現が亢進しています。 関連文献： PMID:9155056
• BMAL1の転写振動に影響を与えることで、概日リズムの調節に関与する可能性があります。
• がん研究における増殖マーカーおよび治療標的として広く使用されています。エトポシドなどの阻害剤はTOP2Aを特異的に標的とし、急速に分裂する細胞にDNA損傷を誘導します。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトTOP2AのC末端付近に位置するペプチドに相当するため、抗体は存在する場合、全長アイソフォームと短縮型アイソフォームの両方を認識する可能性があります。
• ウエスタンブロットでは、ヒト細胞または組織ライセート中に約174 kDaのバンドが予想されます。高分子量領域に適したゲルと、適切な転写条件を使用してください。
• TOP2Aは主に核内に存在するため、検出感度を高めるには核画分の濃縮を検討してください。
• ELISAでは、合成ペプチドを陽性対照として固定化できます。また、コーティングした試料ウェル内の天然TOP2Aを抗体で捕捉することも可能です。
• 本製品はポリクローナル抗体であるため、定量的用途ではロット間の一貫性を確認してください。
• siRNAノックダウン、またはTOP2A陰性細胞株との比較により、抗体の特異性を検証してください。

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