WB、IHC-P、ELISA用抗Topo IIαポリクローナル抗体 - P11388

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：Topo IIαの機能と局在

• TOP2A遺伝子にコードされるDNAトポイソメラーゼIIα（Topo IIα）は、二本鎖DNAを一時的に切断して再結合することでDNAトポロジーを調節し、一方の二重らせんDNAをもう一方の二重らせんDNAに通過させる、重要なATP依存性酵素です（PubMed:17567603、PubMed:18790802、PubMed:22013166）。 関連文献： PMID:17567603 PMID:18790802 PMID:22013166
• Topo IIαは主に核に局在し、核質および核小体に多く存在します。また、特に細胞分裂中には細胞質にも検出されます。
• 扁桃、脾臓、リンパ節、胸腺、精巣などの増殖性組織で広く発現し、高悪性度リンパ腫、肺扁平上皮腫瘍、セミノーマで顕著に過剰発現します（PubMed:9155056）。 関連文献： PMID:9155056
• リン酸化、アセチル化、ユビキチン化などの翻訳後修飾により、Topo IIαの活性、安定性、細胞内局在が調節されます。
• このタンパク質では選択的スプライシングが生じ、分子量174～182 kDaの複数のアイソフォームが生成されます。
• Topo IIαは、BMAL1転写振動の周期長に影響を与えることで、概日リズムの調節にも関与する可能性があります（類似性による推定）。

実験上の指針および技術的ヒント

• 免疫原はC末端領域（アミノ酸1431～1531）由来の合成ペプチドであり、Topo IIαに対して高い特異性を示す可能性があります。
• ウエスタンブロットでは、タンパク質サイズが大きい（約174～182 kDa）ため、タンパク質の転写条件（例：メタノール濃度を下げる、転写時間を延長する）を最適化し、適切な分子量マーカーを用いてバンドを確認してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、抗原賦活化処理（例：熱誘導エピトープ賦活化）を検討し、バックグラウンドを最小限に抑えるため抗体濃度を滴定してください。
• ELISAでは、このポリクローナル抗体を捕捉試薬または検出試薬として使用できます。モノクローナル抗体と組み合わせることで、サンドイッチアッセイにおける特異性が向上する可能性があります。
• 交差反応性はヒトサンプルで検証されています。他の種に使用する場合は、使用前に免疫原配列の相同性を確認してください。

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