ウエスタンブロッティング・ELISA用 抗TRIM32 ウサギポリクローナル抗体 - Q13049

主な製品仕様・パラメータ

生物学的背景：TRIM32の機能と局在

• TRIM32（トライパータイトモチーフ含有タンパク質32）はTRIM32遺伝子にコードされる分子量72kDaのE3ユビキチンタンパク質リガーゼで、HT2A、BBS11、TATIP、LGMD2H、LGMDR8とも呼ばれています。RINGフィンガー、B-box、コイルドコイルドメインを特徴とするTRIMファミリーに属しています。
• E3ユビキチンリガーゼとして、TRIM32は多様な基質に対して「Lys-48」結合型と「Lys-63」結合型のいずれのポリユビキチン化も媒介します。例えば、STING1の「Lys-63」結合型ユビキチン化を促進し、STING1とTBK1の相互作用を促進して下流のIF-β誘導を活性化します。 関連文献: PMID:22745133
• TRIM32は複数のメカニズムを介してオートファジーを正に制御します。AMBRA1と複合体を形成したULK1を活性化するアンカーを持たない「Lys-63」結合型ポリユビキチン鎖を形成し、代謝ストレス下ではCHK2によってリン酸化されたTRIM32がATG7のLys-45をユビキチン化してオートファジーを開始させます。 関連文献: PMID:31123703, PMID:37943659
• 自然免疫において、TRIM32は正と負の両方の制御機能を持ちます。TICAM1（TRIF）のオートファジー分解を引き起こし、TLR3/4を介した炎症反応を抑制する一方、細菌感染時にはマクロファージにおける結核菌のオートファジー介在性除去を促進します。 関連文献: PMID:28898289, PMID:37543647
• TRIM32は細胞質、ミトコンドリア、小胞体に局在し、脾臓、胸腺、前立腺、精巣、卵巣、腸、結腸、骨格筋で発現が認められます。これは免疫機能および筋肉機能における役割と一致しています。
• TRIM32の変異はバルデット・ビードル症候群（BBS11）、肢帯型筋ジストロフィー2H型（LGMD2H/LGMDR8）、知的障害を含むヒト疾患と関連しており、発生と組織恒常性における重要性が示されています。
• このタンパク質はアセチル化やリン酸化などの翻訳後修飾を受けます。代謝ストレス下でのCHK2を介したセリン残基のリン酸化は、オートファジー機能にとって重要です。 関連文献: PMID:37943659
• TRIM32は元々Tat相互作用タンパク質として同定され、生体内でHIV-1 Tatの生物学的活性を媒介する可能性があり、HIV-2やEIAVのTatタンパク質とも相互作用します。 関連文献: PMID:7778269

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体の免疫原はヒトTRIM32のN末端側1-280アミノ酸に相当し、RINGドメインとB-boxドメインを含んでいます。この領域は比較的保存されているため、記載の通りマウスおよびラットTRIM32と交差反応すると予想されます。ウエスタンブロッティングでは、ヒト、マウス、ラットの骨格筋、脳、脾臓などの組織溶解液において、72kDa付近に主要なバンドが検出されると予定されています。特異性を確認するため、適切な陽性対照および陰性対照を使用することを推奨します。
• ELISA用途においては、本抗体がポリクローナルである性質から、捕捉または検出における感度向上が期待できます。ただし、ご使用のアッセイ形式に合わせてコーティングおよび検出条件の最適化を行い、組換えタンパク質または既知の陽性サンプルで性能を検証することを推奨します。
• TRIM32はオートファジーや免疫シグナル伝達に関与しているため、特定の刺激（例：代謝ストレス、ウイルス感染）による細胞処理は発現量や翻訳後修飾を変化させる可能性があり、検出に影響を与える場合があります。実験計画の際にはこれらの変数を考慮してください。

CamelBioについて：ワンストップ調達ブリッジ

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