Anti-TriMethyl-Histone H3-K9 (Q16695/P68431) ウサギモノクローナル抗体（エピジェネティクス用）

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3の機能と局在

• 機能: ヒストンH3はヌクレオソームのコア構成要素であり、DNAを巻き付けて凝縮し、クロマチンを形成することで転写、DNA修復、複製、および染色体の安定性を調節します。ヒストンの翻訳後修飾（ヒストンコードとして知られる）は、クロマチン構造と遺伝子発現を調節します。
• 細胞内局在: 主に細胞核に局在し、細胞周期全体を通じて染色体と結合しています。
• 組織特異性: ヒストンH3バリアントであるH3.1t (Q16695) は精巣細胞に特異的に発現しますが、正規のH3.1 (P68431) は組織全体で広く発現しています。
• 翻訳後修飾: ヒストンH3は多種多様な共有結合修飾を受けることができ、リシン9は重要な調節部位の一つです。リシン9はシトルリン化（アルギニンからシトルリンへの変換）PMID:15345777 PMID:16567635や対称性ジメチルアルギニン化を受けます。さらに、リシン9のトリメチル化（H3K9me3）は、よく特徴づけられている抑制性クロマチンマークです。この抗体は、リシン9でトリメチル化されたヒストンH3を特異的に検出します。 関連参考文献: PMID:15345777, PMID:16567635

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原の設計: この抗体は、ヒトHistone H3のリシン9を含む合成トリメチル化ペプチドを用いて作製されました。本抗体を使用する際は、未修飾のH3ペプチドや、別の修飾（モノメチル、ジメチル、アセチルなど）を持つペプチドに対するテストを行い、トリメチル化状態に対する選択性を確認することで特異性をバリデーションすることを検討してください。
• ウェスタンブロット (WB) およびドットブロット (DB): WBの場合、塩基性タンパク質を濃縮するために標準的なヒストン抽出プロトコル（酸抽出または高塩濃度抽出）を使用してください。非特異的結合を最小限に抑えるために、適切なブロッキングと抗体希釈を行ってください。DBの場合、必要に応じて他のヒストン修飾に対する交差反応性を確認してください。
• 免疫蛍光/免疫細胞化学 (IF/ICC): 核の形態と抗原のアクセシビリティを維持するために、透過処理と固定条件を最適化してください。DAPIによる共染色は、核への局在を確認するのに役立ちます。
• ELISA: ハイスループットスクリーニングに使用してください。特異性を評価するために、合成メチル化ペプチドと非メチル化ペプチドでプレートをコーティングすることを検討してください。
• クロマチン免疫沈降 (ChIP, ChIP-seq) およびCUT&Tag: この抗体は、H3K9me3マーク付きクロマチンのChIPベースの濃縮に適しています。クロスリンクChIP (X-ChIP) またはネイティブChIP (N-ChIP) を使用できます。陽性および陰性対照ゲノム座（例：ヘテロクロマチン対活性化プロモーター）でバリデーションしてください。CUT&Tagの場合、低入力またはシングルセルアプリケーションに関する公開プロトコルに従ってください。大規模な実験の前に、関連するサンプル系で抗体をバリデーションしてください。

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