WB、IHC-P、ELISA用 Anti-UBE2A ポリクローナル抗体 - P49459

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：UBE2Aの機能と局在

• UBE2AはE2ユビキチン結合酵素として機能し、E1酵素からユビキチンを受け取り、E3ユビキチン-タンパク質リガーゼに転移させ、ユビキチン化カスケードにおいて中心的な役割を果たします。 関連文献: PMID:16337599, PMID:20061386, PMID:23685073
• in vitroにおいて、UBE2Aは「Lys-11」結合および「Lys-48」結合の両方のポリユビキチン化を触媒し、鎖結合特異性における多様性を示しています。 関連文献: PMID:20061386
• E3リガーゼBRE1 (RNF20/RNF40) と共に、UBE2AはヒストンH2BのLys-120をモノユビキチン化し (H2BK120ub1)、転写活性化、RNAポリメラーゼII伸長、テロメアサイレンシングに重要なエピジェネティックマークであり、H3K4およびH3K79メチル化の前提条件となります。 関連文献: PMID:16337599
• UBE2Aは、E3リガーゼPRKNのE2酵素として作用することでミトファジーに参加し、ミトコンドリア品質管理に関与しています。 関連文献: PMID:23685073
• E3酵素UBR4との複合体において、UBE2AはN末端ルール経路に関与し、特定のN末端残基を持つタンパク質の分解を指示します。 関連文献: PMID:38182926
• SIFI複合体との会合を通じて、UBE2Aはミトコンドリアストレス応答を抑制し、細胞内プロテオスタシスにおける調節的役割を浮き彫りにしています。 関連文献: PMID:38297121
• 細胞内局在として、UBE2Aは後期エンドソームとリソソームに局在し、タンパク質の輸送とターンオーバーにおける機能と一致しています。
• UBE2Aは選択的スプライシングとリン酸化を受け、DNA損傷応答および知的障害 (MRXSN) に関連するクロマチン調節因子として分類されます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は全長のヒトUBE2Aタンパク質 (残基1–152) を含むため、このポリクローナル抗体は複数のエピトープを認識し、確認済みのヒト、マウス、ラットへの交差性を含め、様々な種における内因性UBE2Aを検出する可能性があります。
• ウェスタンブロット (WB) では、予測される分子量17kDaを考慮してください。特にこの小さなタンパク質サイズを考慮し、バンド特異性を検証するために、細胞溶解条件とローディングコントロールを最適化してください。
• 免疫組織化学 (IHC-P) では、抗原賦活化と検出条件は経験的に決定する必要があります。適切な組織コントロールとブロッキングステップを含め、バックグラウンドを最小限に抑えてください。
• ELISAでは、ポリクローナル抗体の性質上、高い感度が得られる可能性があります。最適なコーティングおよび検出パラメータを確立するために、希釈系列実験やチェッカーボード実験を行うことを推奨します。
• UBE2Aは複数の細胞プロセス (ユビキチン化、クロマチン調節、ミトファジー) に関与するため、この抗体はこれらの経路を調べるために使用できますが、結果は適切な機能アッセイまたはノックダウン/過剰発現実験で裏付ける必要があります。

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