WB、IHC-P、IF/ICC、IP、ELISA用 抗UBE2Cウサギポリクローナル抗体 - O00762

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：UBE2Cの機能と局在

• UBE2C（UBCH10）はユビキチン結合酵素（E2）ファミリーの一員であり、E1酵素からユビキチンを受け取り、基質への転移を触媒する役割を担います。
• このタンパク質は後期促進複合体/サイクロソーム（APC/C）の必須補因子であり、重要な基質をプロテアソーム分解へと標的化することで分裂期進行を調節する重要なE3ユビキチンリガーゼです。
• UBE2Cは主に「Lys-11」結合型ポリユビキチン鎖を触媒し、この非標準的な結合はAPC/C基質の認識とその後の分解に極めて重要です。
• Lys-11鎖に加え、UBE2Cは試験管内で「Lys-48」結合型ポリユビキチン化も媒介することができ、ユビキチン鎖形成におけるその多様性が示されています。
• UBE2C遺伝子の選択的スプライシングにより複数の転写バリアントが生成され、異なる調節特性を持つアイソフォームが生じる可能性があります。
• 翻訳後修飾（リン酸化やアセチル化など）はUniProtのキーワードで示されており、細胞周期におけるUBE2C活性の動的な調節が示唆されます。
• このタンパク質は種間で高度に保存されており、抗体検証で確認されているように、マウスおよびラットのオルソログとの交差反応性が可能です。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 全長免疫原（aa 1-179）はすべてのUBE2Cアイソフォームの認識を可能にするため、一部の組織や細胞状態では分子量がわずかに異なるバンドが観察される可能性があります。
• ウェスタンブロッティングでは、UBE2Cの発現量が分裂期でピークに達するため、分裂期停止細胞ライセート（例：ノコダゾール処理）を陽性対照として使用してください。20 kDa付近のバンドが期待されます。
• 免疫組織化学（IHC-P）および免疫蛍光（IF/ICC）では、クエン酸緩衝液（pH 6.0）を用いた熱誘導抗原賦活化を検討し、高度に増殖する腫瘍や精巣などの既知の陽性組織で検証してください。
• 免疫沈降（IP）では、ポリクローナル抗体はUBE2Cとその相互作用パートナーを濃縮できます。非特異的結合を減らすために、コントロールIgGを用いたプレクリアリングが推奨されます。
• ELISAでは、組換えUBE2Cタンパク質を標準物質として使用し、コーティング抗原濃度と抗体希釈率を最適化してください。ポリクローナル抗体はロット間でわずかな変動が生じる可能性があることに注意してください。
• 特にUBE2C発現が低い、または調節されているサンプルを扱う場合は、特異性を確認するために常に関連する対照（例：UBE2Cノックアウトライセート）を含めてください。

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