WB、IHC-P、ELISA用 抗ユビキチン ウサギモノクローナル抗体 - P0CG47

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：ポリユビキチン-Bの機能と局在

• ポリユビキチン-Bは、UBB遺伝子によってコードされるユビキチン前駆体であり、プロセシングにより複数のユビキチン単位を産生します。
• ユビキチンは、標的タンパク質に共有結合した状態（モノユビキチンまたはポリユビキチン鎖）または遊離状態（非アンカー状態）で存在します。ポリユビキチン鎖は、異なるLys残基（例：Lys-6、Lys-11、Lys-29、Lys-33、Lys-48、Lys-63）または開始Metを介して連結され、それぞれが異なる細胞機能を持ちます。
• Lys-48結合ポリユビキチン鎖は、タンパク質をプロテアソーム分解へと標的化します。一方、Lys-63結合鎖は、エンドサイトーシス、DNA損傷応答、NF-κB活性化などの非分解性シグナル伝達を仲介します。
• その他の結合タイプには、Lys-6（DNA修復）、Lys-11（ERADおよび細胞周期調節）、Lys-29（プロテオトキシックストレス応答および細胞周期）、Lys-33（キナーゼ修飾）、および直鎖状鎖（細胞シグナル伝達）が含まれます。
• 非アンカー状態の遊離ポリユビキチンも、タンパク質キナーゼ活性化およびシグナル伝達経路で機能します。
• ユビキチンは主に細胞質と核に局在し、ミトコンドリア外膜にも見られます。
• ユビキチンの翻訳後修飾には、リン酸化とADP-リボシル化が含まれます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• この抗体は、ヒトユビキチン全長（アミノ酸1-228）をカバーする組換え融合タンパク質を用いて作製されており、単量体および多量体ユビキチン形態の認識に必要なすべての重要な残基を含んでいます。
• ウェスタンブロット（WB）では、予測分子量は26 kDaです。ただし、ユビキチンが様々な標的と結合するため、より高い分子量の一連のバンドが観察される可能性があり、これはポリユビキチン化タンパク質を反映しています。
• 免疫組織化学（IHC-P）を行う場合は、標準的な抗原賦活化法を使用し、適切な陽性および陰性対照組織を用いて染色特異性を検証することを検討してください。
• 広範な種（予測）との反応性は、保存されたエピトープを示唆しています。ヒト、マウス、ラット以外の種を使用する場合は、特定の実験系での交差反応性を確認してください。
• ELISAアプリケーションでは、組換え免疫原を陽性対照として使用し、アッセイの感度と特異性を確立することができます。

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