ウエスタンブロット、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 抗ユビキチン ウサギ モノクローナル抗体 - P0CG47

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: ユビキチン (ポリユビキチン-B) の機能と局在

• UBB遺伝子によってコードされるユビキチンは、高度に保存された76アミノ酸のタンパク質であり、遊離型（アンカーされていない）またはイソペプチド結合を介して標的タンパク質に共有結合した状態で存在します。異なるリジン残基を介したポリユビキチン鎖、または開始メチオニンを介した直鎖状鎖を形成することができます。
• ポリユビキチン鎖は多様な機能を持ちます：Lys48結合鎖はタンパク質をプロテアソーム分解へと標的化し、Lys63結合鎖はエンドサイトーシス、DNA修復、NF-κBシグナル伝達に関与します。その他の結合（Lys6、Lys11、Lys29、Lys33）は、DNA修復、ERAD、細胞周期、プロテオトキシックストレス応答、キナーゼ修飾などのプロセスを調節します。
• このタンパク質は細胞質、核、ミトコンドリア外膜に局在し、細胞の恒常性維持とシグナル伝達における広範な役割を反映しています。
• ユビキチンは、リン酸化やADPリボシル化を含む様々な翻訳後修飾を受け、結合の過程で頻繁にイソペプチド結合を形成します。
• ユビキチンタンパク質ファミリーの一員として、UBBは成熟したユビキチンモノマーに処理されるポリユビキチン前駆体を表しており、細胞の需要に対する安定した供給を保証します。
• ユビキチン結合は一般的に基質上のリジン残基を標的としますが、システインやセリン残基への稀な結合も観察されており、ユビキチンシグナル伝達の範囲を拡大しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトユビキチンのアミノ酸1-100を含み、これは全長の成熟タンパク質をカバーしているため、抗体は総合ユビキチンを認識する可能性があります。アッセイにおいて、遊離型ユビキチンと結合型を区別するために適切な対照を使用することを検討してください。
• ウエスタンブロッティング（WB）では、約26 kDaのバンドはポリユビキチン-B前駆体に対応する可能性がありますが、標的と結合した個々のユビキチンモノマー（約8.5 kDa）は、より高い分子量のスミアとして現れます。ポリユビキチン化された種を分離するために、サンプル調製と検出条件を最適化してください。
• IHC-PおよびIF/ICCでは、既知の陽性および陰性の組織/細胞株における染色パターンを比較することで特異性を確認し、可能であればブロッキングペプチド競合アッセイを含めてください。
• ELISAアプリケーションでは、組換え免疫原または精製ユビキチンを標準物質として使用し、アッセイシステムにおける感度と直線性を検証してください。

CamelBio: ワンストップ調達の架け橋

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