WB、IF/ICC、ELISA用抗ULK4ウサギポリクローナル抗体 - Q96C45

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：ULK4の機能と局在

• ULK4はUnc-51様キナーゼファミリーに属する疑似キナーゼで、FAM7C1およびREC01035としても知られています。触媒キナーゼ活性を欠くことが特徴で、分子アダプターとして機能します。
• ヘッジホッグシグナル伝達経路において、ULK4は一次繊毛で作用し、STK36キナーゼと転写因子GLI2の結合を媒介します。GLI2のリン酸化を促進し、SUFUによる阻害からのGLI2の放出を誘導することで、GLI2の核内移行と標的遺伝子の活性化を可能にします。 関連文献: PMID:38096226
• ULK4は細胞突起、特に繊毛に局在しており、繊毛を介したヘッジホッグシグナル伝達における役割と一致しています。
• タンパク質レベルでは、ULK4の発現は主に脳、特にGABA作動性ニューロンを含む分裂後ニューロンで検出され、アストロサイトには存在しません。
• このタンパク質はATP結合ドメインとヌクレオチド結合能を有していますが、疑似キナーゼに分類されることから非古典的なヌクレオチド利用が示唆されます。
• 複数の反復領域を含み、プロテオミクス解析の結果からリン酸化を受けることがわかっており、調節的な翻訳後修飾が示唆されます。
• GLI2活性化におけるULK4のアダプター機能は、胚発生、幹細胞維持、組織再生を制御する正常なヘッジホッグシグナル伝達に不可欠です。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• ウエスタンブロッティングでは、ULK4の分子量が大きい（約142 kDa）ことから、低濃度のポリアクリルアミドゲル（例：6～8%）を使用し、転写時間を延長することで効率的なタンパク質転写を確保してください。
• 免疫蛍光法または免疫細胞化学では、ULK4が繊毛に局在するため、繊毛構造を維持するために固定・透過処理条件を最適化し、アセチル化チューブリンやArl13bなどの繊毛マーカーとの共局在を確認してください。
• ご使用のサンプル系で抗体特異性を検証するため、ULK4を発現していることが知られている細胞株または組織（例：神経培養物または脳切片）を対照として含め、可能な場合はノックダウン/ノックアウト対照を実施してください。
• ポリクローナル抗体の性質上、ロット間で一貫性に差が生じる場合があります。新しいロットごとに滴定を行い、すべての実験で適切な陽性対照および陰性対照を含めることを推奨します。
• ELISA用途では、コーティングに組換え免疫原または全長ULK4タンパク質を使用し、反応性を確認した上で最適な作動希釈倍率を決定してください。

CamelBioについて：ワンストップ調達ブリッジ

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