WB、IF/ICC、ELISA用抗USP30ウサギポリクローナル抗体 - Q70CQ3

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：USP30の機能と局在

• USP30（ユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼ30）は脱ユビキチン化酵素で、脱ユビキチン化酵素30、ユビキチンチオエステラーゼ30、ユビキチン特異的プロセッシングプロテアーゼ30としても知られ、USP30遺伝子によってコードされています。
• ミトコンドリア外膜に固定されたUSP30は、パーキン（PRKN）の作用を打ち消すことでマイトファジーの主要な阻害因子として働きます。RHOT1/MIRO1やTOMM20などの標的タンパク質上にパーキンによって結合されたユビキチンを加水分解し、それによってパーキンがマイトファジーを誘導する能力を阻止します。 関連参考文献: PMID:18287522 PMID:24896179 PMID:25527291
• 「Lys-6」結合および「Lys-11」結合のポリユビキチン鎖を優先的に切断します。これら2種類の結合はマイトファジーシグナル伝達に関与しており、「Ser-65」でリン酸化されたポリユビキチンは効率的に切断できません。 関連参考文献: PMID:25621951 PMID:25527291
• MFN1およびMFN2の脱ユビキチン化を介して、ミトコンドリア融合を負に制御します。
• 細胞内局在：ミトコンドリア外膜、膜貫通ヘリックスを保有します。
• 組織特異性：骨格筋、膵臓、肝臓、腎臓で発現が認められます。
• ペプチダーゼC19ファミリーに属し、ユビキチン抱合経路に関与するチオールプロテアーゼおよびヒドロラーゼに分類されます。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原はヒトUSP30のアミノ酸57～390番を含み、触媒コア領域を覆っています。マウスおよびラットでの反応性を評価する際は、この領域の保存性を考慮してください。
• ウエスタンブロッティングでは約59 kDaの位置にバンドが検出されることが予想されます。翻訳後修飾により移動度が変化する可能性があるため、ご使用のサンプル系で検出されたバンドのサイズを検証してください。
• 免疫蛍法/ICCではミトコンドリア外膜の染色が予想されます。局在を確認するため、ミトコンドリアマーカーで対比染色することを推奨します。
• ELISA用途では、組換えUSP30タンパク質の標準品が入手可能な場合は、それを用いてコーティング条件と抗体希釈倍率を最適化してください。
• マイトファジー制御の研究を行う際は、モデル系でUSP30の脱ユビキチナーゼ活性を評価するため、パーキンの薬理学的または遺伝学的操作を併用することを検討してください。

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