FC用抗VCAM-1/CD106モノクローナル抗体 - P29533

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：VCAM-1/CD106の機能と局在

• VCAM-1（血管細胞接着分子1）はCD106としても知られ、Vcam1遺伝子にコードされる細胞接着糖タンパク質です。主に内皮細胞の表面に発現し、免疫監視および炎症において重要な役割を果たします。
• VCAM-1は、白血球の内皮への接着を制御する主要な因子として、インテグリン（例：VLA-4/α4β1）との相互作用を介し、リンパ球、単球、好酸球、好塩基球の血管内皮への強固な接着を媒介します。
• 炎症反応時には、VCAM-1と白血球インテグリンの結合により、カルシウムチャネルや低分子量GTPアーゼRAC1の活性化を含む細胞内シグナル伝達カスケードが誘発され、免疫細胞の血管内皮通過遊走が促進されます。
• VCAM-1は、MHCクラスI提示の状況下で「自分を食べないで」シグナルを提供することにより、骨髄への侵入に対する品質管理チェックポイントとしても機能し、生存している造血細胞の貪食を防ぎます。
• このタンパク質には選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが存在します。標準型は約81 kDaの膜貫通タンパク質ですが、切断または選択的スプライシングにより、38 kDaの可溶性型が生成される場合があります。
• 細胞内では、VCAM-1は細胞膜に局在し、分泌型として放出されることもあります。正常組織および炎症組織の炎症血管内皮、ならびにマクロファージ様細胞や樹状細胞タイプ、さらに骨髄で高発現しています。
• 翻訳後修飾には、グリコシル化、ジスルフィド結合形成、ユビキチン化が含まれます。このタンパク質は免疫グロブリン様ドメインと膜貫通ヘリックスを有し、免疫グロブリンスーパーファミリーのメンバーに分類されます。
• 生理的条件下では、VCAM-1の発現はTNF-αやIL-1などのサイトカインによって誘導されます。その発現上昇は炎症性疾患の特徴であり、診断および治療研究における有用な標的となっています。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はN末端細胞外領域（アミノ酸25～310）に相当し、インテグリン結合に関与する最初の免疫グロブリン様ドメインを含みます。この設計により、生細胞上の天然の細胞外エピトープを認識しやすく、透過処理を必要としないフローサイトメトリーに適しています。
• は明るい赤色蛍光色素です。多色パネルを設計する際は、PE、Texas Redおよび類似の蛍光色素とのスペクトル重複を避けてください。適切な補償コントロールの使用を検討してください。
• フローサイトメトリーでは、VCAM-1を発現するマウス細胞株または初代細胞に対する特異的染色の最適濃度を決定するため、抗体を滴定してください。対象細胞としては、TNF-α処理bEnd.3内皮細胞や骨髄由来マクロファージなどが挙げられます。
• 死細胞を除外するため、生細胞／死細胞判別用色素の使用を推奨します。損傷した細胞では非特異的結合が生じる可能性があります。バックグラウンドを最小限に抑えるため、アイソタイプコントロールまたはFcブロックを含めてください。
• マウスに対する交差反応性が確認されていますが、他の種での性能は保証されません。組織で使用する場合は、適切な陽性および陰性コントロールを用いてバリデーションを行ってください。

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