WB、IF/ICC、ELISA用Anti-VEGFAポリクローナル抗体 - P15692

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：VEGFAの機能と局在

• VEGFA（血管内皮細胞増殖因子A）は、血管新生、血管形成、および内皮細胞の増殖、遊走、生存において中心的な役割を果たす長鎖型増殖因子です。受容体であるFLT1/VEGFR1およびKDR/VEGFR2、ならびにNRP1やDEAR/FBXW7-AS1に結合し、多様なシグナル伝達経路を媒介します。 関連文献： PMID:34530889 PMID:17446437
• VEGFAは、HIF1Aなどの重要な遺伝子を誘導することで低酸素応答に関与し、細胞を低酸素による細胞死から保護します。 関連文献： PMID:35455969
• VEGFAの特定のアイソフォームはKDRに結合しますが、下流のシグナル伝達を活性化できず、その結果、血管新生を阻害し腫瘍増殖を抑制します。
• このタンパク質は、細胞外空間やマトリックスにおける分泌型、および細胞質、核、小胞体、ゴルジ体における細胞内プールなど、複数の細胞内局在に存在します。
• VEGFAは多くの組織で広く発現しており、特に正常な下垂体と比較して下垂体腫瘍において発現レベルが高いことが観察されています。
• このタンパク質はヘパリン結合ドメインを持ち、ジスルフィド結合の形成や糖化を受け、マイトジェン（分裂促進因子）および発生因子として機能します。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は、ヒトVEGFAのアミノ酸91～191にまたがる領域（複数のアイソフォームに見られる配列）に対応しているため、このポリクローナル抗体は様々なスプライシングバリアントを認識する可能性があります。
• ウェスタンブロットでは、還元条件下で約27 kDaのバンドが報告されていますが、糖化やアイソフォームの違いにより分子量がシフトする可能性があるため、ローディングコントロールおよびノックアウト/ノックダウンによる検証が推奨されます。
• 免疫蛍光法/免疫細胞化学では、分泌型および細胞内VEGFAの両方を検出できます。エピトープを保持するために、固定および透過処理のプロトコルを最適化してください。
• ELISAアプリケーションの場合、サンドイッチ法のキャプチャーまたは検出抗体として使用できますが、適合する抗体とのペアリングおよび十分な検証が必要です。

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