WB、IHC-P、ELISA用 抗VEGFR1ウサギポリクローナル抗体 - P17948

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：VEGFR1の機能と局在

• VEGFR1（FLT-1）はチロシン・プロテインキナーゼ受容体であり、FLT1遺伝子にコードされるVEGFRファミリーのメンバーです。膜結合型の完全長フォームと、選択的スプライシングによって生成される可溶性分泌型バリアント（アイソフォーム2および3）を含む複数のアイソフォームとして存在します。
• VEGFA、VEGFB、PGFに対する高親和性受容体として機能し、胚性血管系の発生および出生後の血管新生を重要に制御します。内皮細胞の生存と増殖を促進する一方、遊離リガンドを隔離することでVEGFAシグナルを負に調節するデコイ受容体としても機能します。
• リガンドの結合により、PLCG-PKC、PI3K-AKT1、MAPKシグナル伝達カスケードなど、複数の下流経路が活性化されます。SRC、YES1、CBL、PTK2/FAK1などの主要メディエーターをリン酸化し、Ser-473におけるAKT1のリン酸化を誘導します。 関連文献： PMID:16685275
• 細胞内では、VEGFR1は主に細胞膜に局在しますが、エンドソーム、細胞質、および分泌型アイソフォームとしても検出され、その動的な輸送と多様なシグナル伝達機能を反映しています。
• 血管内皮細胞や、胎盤、肝臓、腎臓、心臓、脳などの組織に広く発現しています。アイソフォーム2は胎盤に豊富に存在し、アイソフォーム3は角膜上皮細胞および血管平滑筋細胞に認められます。
• このタンパク質は、N結合型グリコシル化、ジスルフィド結合形成、リン酸化など、機能に重要な広範な翻訳後修飾を受けます。UniProtのキーワードでは、血管新生、走化性、発生における役割が示されています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトVEGFR1の細胞外領域（アミノ酸20～300）に相当するため、膜結合型および可溶性アイソフォームの両方との反応性が示唆されます。使用する実験系において、適切なエピトープ検証を行ってください。
• ウェスタンブロッティングでは、予想分子量は約151 kDaです。ただし、グリコシル化によりバンドシフトが生じる場合があります。適切な対照（例：ブロッキングペプチドまたはノックダウン溶解液）を用いて特異性を検証してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、ホルマリン固定パラフィン包埋組織に対して、十分な抗原賦活化法を推奨します。まずは標準的なクエン酸またはEDTAベースのプロトコルから開始し、検出条件を最適化してください。
• ELISAでは、本抗体を捕捉試薬または検出試薬として使用できます。抗体を段階希釈して最適な使用濃度を決定し、サンドイッチ形式では相補的な抗体ペアを用いて交差検証してください。
• マウスおよびラットとの交差反応性があるため、本抗体はトランスレーショナル研究に適していますが、関連する陽性対照および陰性対照を用いて、種特異的な性能を確認してください。

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