WB、IF-P、ELISA用 抗ビンキュリン モノクローナル抗体 - P18206

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：ビンキュリンの機能と局在

• ビンキュリンは高度に保存されたアクチン結合タンパク質であり、インテグリンおよびカドヘリンをアクチン細胞骨格に連結し、細胞-基質および細胞-細胞接着において重要な役割を果たします。
• 筋肉特異的アイソフォームであるメタビンキュリン（MV）は、選択的スプライシングにより生じ、追加のエクソンを含みます。主に心筋および骨格筋で発現しています。
• ビンキュリンは、細胞-基質焦点接着、細胞-細胞接着結合、核周辺領域、ならびにポドソームや筋線維膜などの特殊化構造に局在します。
• 本タンパク質は、その活性化、タンパク質相互作用、膜ターゲティングを調節する、リン酸化、アセチル化、パルミトイル化を含む複数の翻訳後修飾を受けます。
• ビンキュリンはメカノセンサーとして機能します。張力誘導性の立体構造変化により、タリンおよびF-アクチンに対する隠れた結合部位が露出し、接着複合体が強化されます。
• カドヘリン-カテニン複合体の主要構成要素として、ビンキュリンはE-カドヘリンの細胞表面発現を調節し、接着結合におけるメカノセンシングを増強し、組織形態形成および恒常性に影響を与えます。
• 接着およびメカノトランスダクションにおける必須の役割と一致して、VCLの変異は拡張型心筋症（CMD1W）および肥大型心筋症（CMH15）と関連しています。
• さらに、ビンキュリンは、ポドソームへのリクルートおよびラメリポディア動態への影響から明らかなように、細胞形態、遊走、浸潤にも関与します。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトビンキュリンのC末端領域（aa800-900）に対応する合成ペプチドです。この領域はヒト、マウス、ラット間で保存されており、報告されている交差反応性を説明します。
• ウェスタンブロッティングでは、ビンキュリンは約124 kDaの見かけの分子量で移動します。適切なゲル濃度（例：8% SDS-PAGE）を使用し、全タンパク質染色を用いて転写効率を確認してください。
• 免疫蛍光（IF-P）では、焦点接着および接着結合の構造を保持する固定および透過化条件（例：4% PFA、その後0.1% Triton X-100）を考慮してください。パキシリンやF-アクチンマーカーとの共染色により局在を確認できます。
• ELISAを行う際は、免疫原ペプチドおよび天然タンパク質に対して抗体を滴定し、最適濃度を決定してください。複雑なマトリックスで高いバックグラウンドが観察される場合は、交差吸着を評価することができます。
• ビンキュリンは普遍的に存在するタンパク質であるため、定量的解析には適切なローディングコントロール（例：GAPDH、β-アクチン）を含めることが不可欠です。
• 筋肉組織を含む研究では、本抗体がビンキュリンおよびメタビンキュリンアイソフォームの両方を認識する可能性があることに注意してください。後者は約150 kDaでわずかに高く移動します。

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