WB/IHC-P/ELISA用抗ヒトvon Willebrand因子（VWF）ウサギポリクローナル抗体 - P04275

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：von Willebrand因子の機能と局在

• von Willebrand因子（VWF）は止血に不可欠な多量体血漿糖タンパク質であり、血管損傷部位での血小板接着を促進するために、血管内皮下コラーゲンと血小板GPIb-IX-V受容体の間をつなぐ分子ブリッジとして機能します。
• VWFは凝固第VIII因子のシャペロンとしても機能し、そのヘテロ二量体構造を安定化するとともに、血漿からの早期クリアランスを防ぎます。
• 第12染色体上のVWF遺伝子（GeneID：7450）によってコードされるこのタンパク質は、2813アミノ酸のプレプロタンパク質として合成され、糖鎖付加や多量体化を含む広範な翻訳後プロセシングを受けます。
• このタンパク質は分泌されて細胞外に局在し、細胞外マトリックスの構成要素となるほか、血漿中を循環します。
• VWFには複数の機能ドメインが含まれており、その中には血小板糖タンパク質Ibおよびコラーゲンとの相互作用を媒介するAドメインがあります。
• VWF遺伝子の変異は、血小板接着不全および第VIII因子レベルの低下を特徴とする出血性疾患であるvon Willebrand病（VWD）と関連しています。
• VWF転写産物の選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成されますが、多くのバリアントの機能的意義については現在も研究が続けられています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はVWFのC末端領域であるアミノ酸2645-2813に相当します。この配列により、変性条件下のウェスタンブロット（WB）で主要なすべてのアイソフォームを検出できる可能性があります。
• IHC-Pでは、VWFが血管内皮および血小板に豊富に発現しているため、抗原賦活化法および抗体希釈倍率を最適化する必要があります。
• ELISAでは、競合を避けるため、重複しないエピトープを標的とする捕捉抗体との組み合わせを検討してください。
• 成熟VWFは分子量が大きい（309 kDa）ため、効率的な検出を確実にするには、低濃度（5–6%）のSDS-PAGEゲルと長めの転写時間を使用してください。
• VWFは多量体構造を持つため、WBで単量体の形態を分離するには還元剤（DTTなど）の使用が推奨されます。非還元条件では多量体ラダーが確認される場合があります。

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