フローサイトメトリー用 APC 抗LGR5モノクローナル抗体 - O75473

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：LGR5の機能と局在

• LGR5（GPR49、GPR67、HG38としても知られる）は、R-spondin（RSPO1～RSPO4）の受容体として機能するロイシンリッチリピート含有Gタンパク質共役受容体です。
• R-spondinに結合すると、LGR5はリン酸化LRP6およびFrizzled受容体と会合することで標準的なWntシグナル伝達経路を増強し、Wnt標的遺伝子の発現を高めます。
• 古典的なGタンパク質共役受容体とは異なり、LGR5はシグナル伝達のためにヘテロ三量体Gタンパク質を活性化しません。
• LGR5は腸管上皮および毛包の確立された幹細胞マーカーであり、出生後の発生過程における成体腸管幹細胞の発生および維持に重要な役割を果たします。
• この受容体は主に細胞膜に局在し、ゴルジ体およびトランスゴルジネットワーク膜にも検出されます。
• 発現は骨格筋、胎盤、脊髄、およびさまざまな脳領域で認められます。腸管内では、結腸および小腸粘膜上皮の陰窩基部に存在する幹細胞を標識し、卵巣がん、結腸がん、および肝がんで過剰発現することが報告されています。
• 翻訳後修飾にはN結合型糖鎖付加およびジスルフィド結合形成が含まれます。このタンパク質は、選択的スプライシングにより複数のアイソフォームとして存在します。

実験上の指針および技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトLGR5の細胞内領域であるアミノ酸480～580にまたがっています。APC結合体により、二次抗体を使用せずにフローサイトメトリーで直接検出できます。
• フローサイトメトリーでは、エピトープへのアクセス性が異なる可能性があるため、生細胞表面染色と細胞内染色の両方のプロトコルを検討してください。抗体が標的とするエピトープが細胞外表面に露出していない場合は、透過処理が必要になることがあります。
• LGR5は幹細胞集団に発現するため、LGR5陽性細胞を正確に同定するには、組織を適切に解離して単細胞懸濁液を調製し、生細胞を対象にゲーティングすることが推奨されます。
• 適切なコントロールを用いて、関連する実験系（ヒト腸管オルガノイド、がん細胞株、または初代組織など）で抗体を検証してください。

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