フローサイトメトリー用 APC マウス抗ヒト CD3 モノクローナル抗体 - P07766

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD3 イプシロンの機能と局在

• CD3E（CD3 イプシロン鎖、別名 T3E、TCRE、IMD18）は、T細胞上に発現する TCR-CD3 複合体のサブユニットであり、適応免疫において重要な役割を果たします。 関連文献： PMID:15294938 PMID:15546002 PMID:2470098

• TCRが結合すると、CD3Eは他のCD3鎖とともに、免疫受容体チロシンベース活性化モチーフ（ITAM）を介して膜を越えて活性化シグナルを伝達します。 関連文献： PMID:2470098 PMID:40592325

• LCKおよびFYNによるITAMのリン酸化によってZAP70のドッキング部位が形成され、カルシウム流入やMAPK/ERK経路などの下流シグナル伝達カスケードが開始されます。 関連文献： PMID:2470098 PMID:40592325

• CD3EはT細胞の発生に不可欠であり、胸腺細胞の選択および成熟に関与します。

• CD3Eにはエンドサイトーシスモチーフが含まれており、TCR-CD3複合体の細胞内取り込みと細胞表面でのダウンレギュレーションを媒介し、シグナル持続時間を調節します。 関連文献： PMID:10384095 PMID:26507128

• CD3EはITPRIPL1の受容体としても機能し、NCK1との相互作用を促進してZAP70の結合およびNF-kBシグナル伝達を阻害することで、T細胞の活性化を抑制します。 関連文献： PMID:12110186 PMID:38614099

• 細胞内では、CD3Eは細胞膜に局在しており、細胞外リガンドの認識およびシグナル伝達における役割と一致しています。

• CD3Eは、シグナルペプチド、免疫グロブリンドメイン、膜貫通ヘリックス、細胞質ITAMモチーフを有し、リン酸化およびジスルフィド結合形成を受けます。

実験手順および技術上のヒント

• フローサイトメトリーでは、細胞集団に適した最適な染色濃度を決定するために抗体を滴定してください。通常、1×10⁶細胞あたり0.5～5 µgが開始点として適しています。
• 特異性を確保するため、適切なアイソタイプコントロールおよび蛍光マイナス1（FMO）コントロールを設定してください。
• APCコンジュゲートは633～647 nmのレーザーで励起されます。光退色を防ぐため、光への曝露を最小限に抑えてください。
• 組換えタンパク質由来の抗体であるため、天然のCD3イプシロン鎖を認識します。細胞内エピトープを検出する場合は、固定および透過化が必要になることがあります。
• 本抗体はヒト検体でバリデーション済みです。他の種との交差反応性は確認されていないため、必要に応じて関連するモデル系で試験してください。

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