フローサイトメトリー用APC標識 ウサギ抗ヒトEGFRモノクローナル抗体 - P00533

主な製品仕様・パラメータ

生物学的背景：EGFRの機能と局在

• 上皮成長因子受容体（EGFR）はプロトタイプの受容体型チロシンキナーゼで、EGFファミリーリガンドが結合するとホモ二量体化またはヘテロ二量体化して自己リン酸化を起こし、RAS-RAF-MEK-ERK、PI3K-AKT、PLCγ-PKC、STATなどの主要な下流シグナル伝達カスケードを活性化します (PubMed:27153536, PubMed:2790960)。 関連参考文献: PMID:27153536, PMID:2790960
• これまでに知られているEGFRリガンドには、EGF、TGF-α、アンフィレギュリン（AREG）、エピゲン（EPGN）、ベータセルリン（BTC）、エピレグリン（EREG）、ヘパリン結合EGF様増殖因子（HBEGF）があり、それぞれが異なるシグナル伝達動態を誘発します (PubMed:12297049, PubMed:15611079, PubMed:17909029)。 関連参考文献: PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• リン酸化されたEGFRはGRB2などのアダプタータンパク質を動員し、細胞の増殖、生存、遊走、分化を制御する複雑な細胞内シグナル伝達を開始します (PubMed:10805725)。 関連参考文献: PMID:10805725
• 標準的な経路に加え、EGFRはRGS16（Gタンパク質シグナル伝達と結合）(PubMed:11602604) やMUC1（SRC/βカテニン相互作用を促進）(PubMed:11483589) などの基質を直接リン酸化します。 関連参考文献: PMID:11602604, PMID:11483589
• EGFRはCCDC88A/GIVとの相互作用を介して細胞運動性を調節します。GIVは受容体を形質膜に保持し、遊走促進シグナルを維持します (PubMed:20462955)。 関連参考文献: PMID:20462955
• NF-κBカスケードを活性化することもあり (PubMed:11116146)、類似性から、学習、記憶、痛覚過敏などの神経学的プロセスにも寄与すると考えられています。 関連参考文献: PMID:11116146
• アイソフォーム2はEGF作用の潜在的なアンタゴニストとして働き、特に卵巣がんで発現が認められます。
• 亜細胞局在は形質膜、小胞体、ゴルジ体、エンドソーム、核に及び、受容体は分泌されることもあります。翻訳後修飾には、グリコシル化、リン酸化、ユビキチン化、パルミトイル化が含まれます。
• EGFRは肝細胞へのC型肝炎ウイルス（HCV）侵入の際に宿主細胞受容体として働き、CD81-CLDN1複合体の形成を促進します。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体の免疫原はヒトEGFRの細胞外ドメイン内のアミノ酸335～525番に対応するため、APC標識された本抗体は直接フローサイトメトリーによる表面EGFRの検出に非常に適しています。
• EGFRは遍在的に発現しているため、適切なアイソタイプ対照を設け、初期セットアップにはEGFR陽性が知られている細胞株（例：A431やHeLa）の使用を検討してください。
• 最適なシグナルを得るため、抗体を滴定して最適な染色濃度を決定し、ご自身の特定の実験条件下で検証を行ってください。
• 他の蛍光色素と共染色する場合は、スペクトルの適合性を確認し、補償対照を実施してください。

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