APC標識ウサギ抗ヒトNT5E/CD73 モノクローナル抗体（フローサイトメトリー用） - P21589

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：NT5E/CD73の機能と局在

• 中核的な酵素活性： NT5E/CD73は、細胞外ヌクレオシド一リン酸をヌクレオシドと無機リン酸に加水分解する5'-ヌクレオチダーゼであり、他の基質よりもAMPを強く優先します。このステップは、ATPからの免疫抑制性アデノシン生成における律速段階です。
  関連文献：
  PMID:21933152 PMID:22997138 PMID:23142347 PMID:34403084
• 基質特異性： AMP以外にも、IMP、UMP、GMP、CMP、およびいくつかのデオキシヌクレオチド（dAMP、dCMP、dTMP）、さらにNADやNMNにも作用しますが、リボヌクレオチド一リン酸が優先される基質です。
• 細胞内局在： CD73は、C末端のグリコシルホスファチジルイノシトール（GPI）アンカーを介して細胞膜外葉に結合しており、その活性部位は細胞外空間に位置し、細胞周囲のヌクレオチドプールを調節します。
• 翻訳後修飾： このタンパク質はN-グリコシル化されており、構造的に重要なジスルフィド結合を含みます。膜への結合は完全にGPIアンカーに依存しています。
• 構造的特徴： 5'-ヌクレオチダーゼファミリーに属し、触媒活性には亜鉛や他の二価金属イオンを必要とします。分子は細胞表面上でホモ二量体として存在します。
• 疾患関連性： NT5Eの変異は、稀な遺伝性疾患であるCD73欠損症による動脈石灰化（ACDC）と関連しており、このタンパク質は腫瘍学における重要な免疫チェックポイント標的です。

実験ガイドと技術的ヒント

• 免疫原は触媒領域および基質結合領域を含む全エクトドメイン（アミノ酸27–547）をカバーしています。この設計は、生細胞上の天然で適切に折り畳まれたCD73の認識に有利です。
• フローサイトメトリーでは、対象とする細胞種に最適な染色濃度を決定するために抗体の希釈系列を作成することを検討してください。適切なアイソタイプコントロールおよび生存性染色色素を含めてください。
• 一部の系では、CD73は細胞外小胞上に放出または放出されます。偽陰性シグナルを避けるために、細胞損傷を最小限に抑えるサンプル調整を確実に行ってください。
• このAPC標識体はマルチプレックスパネルに適しています。他の蛍光色素と組み合わせる際は、補正設定を確認してください。

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