フローサイトメトリー用 APC 標識 ラット抗マウスF4/80 モノクローナル抗体 - Q61549

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：接着性Gタンパク質共役受容体E1（F4/80）の機能と局在

• 接着性Gタンパク質共役受容体E1（遺伝子名：Adgre1）はEMR1またはF4/80としても知られる単回貫通膜型糖タンパク質で、EGF様ドメインを有することを特徴とする接着性Gタンパク質共役受容体ファミリーに属します。
• 細胞接着や免疫細胞間相互作用に関与するオーファン受容体として機能し、制御性T細胞（Treg）の発生に関与することが示唆されています。
• この受容体は主に成熟マクロファージの表面に発現しますが、リンパ節や脾臓のT細胞領域に存在するマクロファージには発現しておらず、血液単球では発現量が低いことが知られています。
• F4/80は細胞膜に局在し、接着および細胞間コミュニケーションに機能するという特徴と一致しています。
• 細胞外領域には複数のEGF様反復配列とムチン様ドメインが存在し、これらは高度に糖化されているため、構造の安定性とリガンド結合能に寄与しています。
• 配列解析から、EGFドメイン内にジスルフィド結合、保存されたGPCR自己タンパク質分解誘導ドメインの存在が確認されていますが、プロテアーゼによって活性化されるシグナル伝達はこれまで報告されていません。
• F4/80はマクロファージに限定的に発現することから、マウス免疫系においてマクロファージ集団を同定・分類するための有用なマーカーとして機能しています。
• この受容体は「適応免疫」「糖タンパク質」「Gタンパク質共役受容体」といった免疫関連のキーワードに分類されており、免疫細胞生物学における特化した役割が強調されています。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体の免疫原はマウスF4/80の組換えタンパク質です。特異性の確認には、F4/80欠損細胞モデルやノックアウトマウス組織を用いた反応性比較を行うことを推奨します。
• 本APC結合抗体はフローサイトメトリーでの使用が検証済みです。最適な染色結果を得るため、対象の細胞集団を用いて抗体の滴定を行い、適切なアイソタイプコントロールを設けてください。
• マルチカラーフローサイトメトリーパネルで使用する際は、特に他のAPC適合蛍光色素や検出器と組み合わせる場合に、コンペンセーションを十分に調整してください。
• マクロファージにおけるF4/80の発現プロファイルから、典型的なポジティブコントロールとしてはチオグリコレート誘発腹腔マクロファージや骨髄由来マクロファージが使用できます。マウス初代血液単球は発現量が低いため、dimコントロールとして利用可能です。
• 固定・透過処理プロトコルを使用する場合は、抗原性が保持されるか事前に評価を行ってください。表面マーカーの完全性を維持するため、新鮮分離した細胞を使用することが推奨されます。

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