ASC/TMS1 ウサギポリクローナル抗体（WB、IF、IHC-P、ELISA対応） - Q9ULZ3

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ASC/TMS1 の機能と局在

• ASC/TMS1（CARD含有アポトーシス関連斑点様タンパク質）、別名 PYCARD、CARD5、または TMS-1 は、N末端ピリンドメイン（PYD）とC末端カスパーゼ動員ドメイン（CARD）からなる22 kDaのアダプタータンパク質です。
• インフラマソームの足場として中心的な役割を果たし、NLRセンサー（NLRP1、NLRP3、NLRC4）またはAIM2とプロカスパーゼ-1を架橋することで、カスパーゼ-1の活性化、IL-1βおよびIL-18の成熟、ならびにピロトーシス細胞死を駆動します。 関連参考文献： PMID:15030775, PMID:16982856, PMID:17349957, PMID:24630722
• ASCは、BIDのカスパーゼ-8依存性切断、ミトコンドリアへのBAX転移、およびそれに続くカスパーゼ-9および-3の活性化を促進することによりアポトーシスを媒介し、これは多くの場合、FADDとは非依存的に行われます。 関連参考文献： PMID:11103777, PMID:12646168, PMID:14730312, PMID:16964285
• 核内において、ASCはIKK複合体を阻害し、RIPK2と競合することでNF-κBシグナル伝達を調節し、炎症性遺伝子発現を微調整します。 関連参考文献： PMID:12486103, PMID:16585594
• ASCは、細胞質、インフラマソーム斑点（スペック）、小胞体、ミトコンドリア、核、およびゴルジ体を含む複数の細胞内区画に局在しており、免疫シグナル伝達およびアポトーシスにおける多様な役割と一致しています。
• 低レベルで広く発現しており、末梢血白血球、肺、小腸、脾臓、胸腺、および結腸でより高豊富に見られます。腫瘍ではプロモーターのメチル化によって発現が沈黙化していることが多く、報告されている腫瘍抑制因子活性と一致しています。 関連参考文献： PMID:23229815
• ASCは、ユビキチン化やリン酸化など、インフラマソームの集合とシグナル強度を制御する調節的な翻訳後修飾を受けます。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はPYDドメインとCARDドメインを架橋する中央領域（aa 50–195）にまたがっており、全長ASCおよびスプライス変異体の両方に対する反応性を付与する可能性があります。ノックダウンまたはノックアウトコントロールによって特異性を検証することを検討してください。
• ウェスタンブロットでは、22 kDa付近の主なバンドが期待されます。THP‑1細胞またはヒト末梢血単核細胞のポジティブコントロールライセートを使用し、分解を最小限に抑えるためにプロテアーゼ阻害剤を含めてください。
• 免疫蛍光およびICCでは、斑点様凝集体は活性化されたインフラマソームの特徴です。NLRP3、AIM2、またはカスパーゼ‑1に対する抗体での二重染色を行うことで、インフラマソームの形成を確認できます。固定と透過処理の条件は、細胞種と活性化状態に合わせて最適化する必要があります。
• IHC‑P（パラフィン包埋組織）では、クエン酸緩衝液（pH 6.0）による抗原賦活化と内在性ペルオキシダーゼのブロックが推奨されます。炎症が知られている組織（例：炎症性結腸、扁桃）は適切なポジティブコントロールとして機能します。
• ELISAアプリケーションの場合、このポリクローナル抗体をキャプチャーモノクローナル抗体とペアにすることでシグナルが向上する可能性があります。組換えASCタンパク質を使用して、アッセイの直線性と特異性を検証してください。
• この抗体はヒト、マウス、ラットのASCを検出しますが、交差反応性はアッセイ形式によって異なる可能性があるため、種特異的な検証を行うことをお勧めします。

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