非対称ジメチル化ヒストンH3-R8 ウサギpAb (Q16695 / P68431) – WB、IHC-P、ChIP、ELISAで検証済み

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3（非対称ジメチルR8）の機能と局在

ヒストンH3はヌクレオソームのコア構成要素であり、DNAを巻き付けてクロマチンへと凝縮し、細胞機構に対するDNAのアクセシビリティを制限します。ヒストンは転写制御、DNA修復、DNA複製、染色体安定性において中心的な役割を担っています。DNAのアクセシビリティは「ヒストンコード」と総称される複雑な翻訳後修飾（PTM）のセットとヌクレオソームリモデリングによって動的に制御されています。 関連参考文献: UniProt Q16695, UniProt P68431

ヒストンH3上の多数のPTMのうち、アルギニンメチル化はタンパク質アルギニンメチルトランスフェラーゼ（PRMT）によって触媒され、非対称型または対称型の形態が存在します。H3R2の非対称ジメチル化はPRMT6によって媒介されます PMID:17898714。一方、H3R17の非対称ジメチル化はCARM1によって触媒されます PMID:15345777。H3R8残基はPRMT5によって対称的にジメチル化されることが知られていますが、非対称ジメチル化H3R8も特異的なエピゲノムマークとして報告されています。本抗体はR8における非対称ジメチル化状態を標的としており、この修飾を識別することができます。

ヒストンH3は核およびクロマチンに局在します。標準型のH3.1アイソフォーム（P68431）は遍在的に発現します。一方、H3.1tバリアント（Q16695）は精巣細胞で特異的に発現します。 関連参考文献: PMID:16567635（R8/R2/R17のシトルリン化に関する文献）

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はR8に非対称ジメチル化を持つ合成ペプチドであり、本抗体はこの修飾を特異的に認識することが期待されます。ただし、配列相同性により、他のメチル化ヒストンH3バリアントまたは部位との交差反応が生じる可能性があります。特異性はペプチド競合実験、ノックアウト/ノックダウン、または部位特異的突然変異誘発により検証してください。
• ウエスタンブロットの場合、予想される分子量は約15 kDaです。ヒストンは非常に塩基性が高いため、修飾型を分離するには酸-尿素ゲルを使用するか、適切な対照を含めてください。
• ChIPの場合、非対称ジメチル化H3R8は特定のクロマチン状態をマークしている可能性があるため、架橋および剪断条件を最適化してください。
• 記載されている応用分野はWB、IHC-P、IF/ICC、ELISA、ChIPです。希釈倍率は経験的に決定する必要があり、すべてのアッセイに適切な陰性対照および陽性対照を含める必要があります。
• ヒストンH3の配列高度な保存性から、ヒト、マウス、ラット、その他の種に対して交差反応性が予測されています。実際に使用する試料系で確認してください。

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