フローサイトメトリー用ビオチン標識抗CD8aモノクローナル抗体 - P01732

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：CD8a（T細胞表面糖タンパク質CD8α鎖）の機能と局在

• CD8aは膜貫通型糖タンパク質であり、T細胞上のMHCクラスI分子に対する共受容体として機能し、細胞質タンパク質に由来するペプチド抗原の認識を可能にします。
• 抗原提示細胞上でT細胞受容体（TCR）およびMHCクラスIと同時に相互作用し、SrcキナーゼLCKをリクルートしてシグナル伝達カスケードを開始し、T細胞の活性化、リンホカイン産生、細胞傷害性へと導きます。
• CD8aは、胸腺由来T細胞上ではCD8Bとのヘテロ二量体を形成し、ナチュラルキラー細胞、メモリーT細胞、上皮内リンパ球、単球、および樹状細胞の一部ではホモ二量体（CD8a／CD8a）を形成します。
• このタンパク質は細胞膜に局在しますが、選択的スプライシングに由来すると考えられる分泌型も存在します。
• 主要な翻訳後修飾には、糖鎖付加、ジスルフィド結合形成、パルミトイル化があり、これらは構造および膜との結合に重要です。
• CD8aは免疫グロブリン様ドメインを有し、適応免疫系の一部として、胸腺での選択およびメモリーCD8 T細胞の生成に関与します。
• CD8Aの疾患関連変異は免疫不全と関連しており、免疫防御における重要な役割を示しています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 本抗体は、ヒトCD8Aの細胞外ドメイン（aa 22～182）に相当する組換えタンパク質を抗原として作製されており、MHCクラスI結合領域の重要な部分を含みます。フローサイトメトリーでは、CD8a発現細胞株およびCD8aノックアウト細胞株を用いて特異性を確認することを推奨します。
• フローサイトメトリー用途では、抗原密度にばらつきがあるため、関連する初代細胞（例：ヒトPBMCまたはカニクイザルリンパ球）を用いて最適な染色濃度を滴定してください。ビオチン‐ストレプトアビジン検出システムにより感度を高められる場合があります。
• カニクイザルCD8aとの交差反応性によりトランスレーショナル研究が可能ですが、エピトープの保存性は異なる場合があるため、使用するアッセイ系での性能を確認してください。
• CD8aは複数の免疫細胞サブセットに発現しているため、細胞傷害性T細胞をNK細胞およびメモリー細胞集団から区別するには、追加マーカー（例：CD3、CD4）を組み込んだゲーティング戦略が必要です。
• 細胞内染色では、透過処理によってエピトープへのアクセス性が変化する可能性があります。陽性および陰性対照を用いて、固定／透過処理プロトコルを検討してください。

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